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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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千里幽寻

金虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白

考马斯亮蓝:100mg G250+50ml 95%乙醇+100ml磷酸,定容1000ml ,抽滤
标准蛋白:  0.5mgSBA,定容至500ml

标准曲线方法:
                                          0             1            2           3          4        5   
蛋白添加量(0.1mg/ml)        0            0.2         0.4       0.6        0.8       1.0   (ml)
       水     (ml)                  1            0.8         0.6      0.4         0.2       0
考马斯亮蓝(ml)                  4             4            4         4            4         4
每个浓度做三个平行
测出来的吸光度如果不算零点,R*2值很高,可是如果加上零点的话,差别很大啊。下面是图

帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白
带零点.jpg


帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白-1
无零点.jpg
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Iamaslowwalker,butIneverwalkbackwards.
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yuchuanbai

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-03-16 13:22:56
千里幽寻: 金币+10 2014-03-21 17:31:18
对啊,但是怎么做曲线时加0点?蛋白添加量为0的样品就是空白,测OD值时将其放置比色池中吸光度按归零吧,你做了0.2,0.4,0.6,0.8,1.0这五个点,用这五个点的吸光度值就成了,哪里冒出来个(0,y)点呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-03-16 11:11:41
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千里幽寻

金虫 (小有名气)

用的是玻璃比色皿,595nm
Iamaslowwalker,butIneverwalkbackwards.
2楼2014-03-14 11:25:13
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yuchuanbai

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-03-14 14:31:03
你用什么做空白?蛋白添加量为0的样品不是空白吗?就是你说的零点吧,不明白你用什么做的空白。
3楼2014-03-14 14:07:41
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千里幽寻

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuchuanbai at 2014-03-14 14:07:41
你用什么做空白?蛋白添加量为0的样品不是空白吗?就是你说的零点吧,不明白你用什么做的空白。

去离子水1ml+4ml考马斯亮蓝染液做空白
Iamaslowwalker,butIneverwalkbackwards.
4楼2014-03-14 14:11:49
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