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seven9870

新虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测蛋白,含量怎么计算?

用考马斯亮蓝法测蛋白含量,已测出样品的吸光度值,带入标准曲线回归方程后,得出样品浓度C,问怎么计算样品中的蛋白质百分含量?
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zjzjzhujun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测的样品应该稀释了的吧,乘以稀释倍数呀
2楼2012-11-21 20:04:19
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seven9870

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zjzjzhujun at 2012-11-21 20:04:19
测的样品应该稀释了的吧,乘以稀释倍数呀

假如我用水溶解2g干粉,定容到100ml,然后取5ml定容到10ml作为待测液,测后查得浓度为c1,那么怎么计算那2g干粉中的蛋白质含量呢?是不是c1x2/2x104 x100%?
3楼2012-11-21 20:57:39
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zjzjzhujun

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by seven9870 at 2012-11-21 20:57:39
假如我用水溶解2g干粉,定容到100ml,然后取5ml定容到10ml作为待测液,测后查得浓度为c1,那么怎么计算那2g干粉中的蛋白质含量呢?是不是c1x2/2x104 x100%?...

相当于总体积200mL的浓度为C1的溶液 c1x100mLx2/2g x100%
如果C1单位是g/ml,即100C1x100%
4楼2012-11-22 19:28:45
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
保持和标准曲线抑制即可,标准曲线怎么设置横坐标的样品酒怎么计算,不会可发数据给我  我帮助你计算
5楼2012-11-22 22:24:03
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seven9870

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhouxj at 2012-11-22 22:24:03
保持和标准曲线抑制即可,标准曲线怎么设置横坐标的样品酒怎么计算,不会可发数据给我  我帮助你计算

谢谢了。我就是用水溶解2g干粉,定容到100ml作为原液,然后取这个原液1ml再定容到100ml作为待测液,就是稀释了100倍测。测后查得浓度为62.85ug/ml,现在我想计算那2g干粉中的蛋白质含量,要怎么算呢?
6楼2012-11-23 13:57:18
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你先用凯氏定氮法测出样品中粗蛋白的含量 然后用考马斯亮蓝法测出提取液中蛋白质的含量
7楼2012-11-23 16:47:47
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
seven9870: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 明白了,多谢!! 2012-11-27 15:56:33
引用回帖:
6楼: Originally posted by seven9870 at 2012-11-23 13:57:18
谢谢了。我就是用水溶解2g干粉,定容到100ml作为原液,然后取这个原液1ml再定容到100ml作为待测液,就是稀释了100倍测。测后查得浓度为62.85ug/ml,现在我想计算那2g干粉中的蛋白质含量,要怎么算呢?...

这个好办,一直为此类问题而不断强调过,这样计算,62.85*100(倍)*100ml*0.001mg/2000mg,请注意,你一定要保证你给我说的62.85ug/ml计算的是正确的,还不会可将标准曲线的原始数据和测定的具体步骤发过来我给你算,本人保证不用你的数据,根据我带学生的经验来看,问题主要出在像62.85ug/ml这样的步骤上了,后面的处理很简单,一句话,要保证标准曲线和样品浓度计算的时候的同步,处理手法的同步
8楼2012-11-23 23:11:07
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seven9870

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by zhouxj at 2012-11-23 23:11:07
这个好办,一直为此类问题而不断强调过,这样计算,62.85*100(倍)*100ml*0.001mg/2000mg,请注意,你一定要保证你给我说的62.85ug/ml计算的是正确的,还不会可将标准曲线的原始数据和测定的具体步骤发过来我给你 ...

还想请教一个问题,不知道您在多糖这方面是否了解,算法和上面蛋白质的类似吗,据说需要乘个校正系数0.9是吗?
9楼2012-11-27 15:58:54
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

算法类似,乘0.9是为了考虑水解的时候加入了一份子水的缘故,即 总糖+18生成180,明白了吗
10楼2012-11-27 16:13:41
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