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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝G250原理
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wangwt05

金虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝G250原理

请问考马斯亮蓝G250测蛋白质量的原理是什么？和蛋白质中的什么基团结合？

可以用这个方法测谷胱甘肽GSH的含量吗？
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1楼 2012-02-20 15:09:14
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回帖置顶 ( 共有1个 )

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-02-20 19:39:27
考马斯亮蓝G－250是一种染料，在游离状态下呈红色，当它与蛋白质结合后变为青色。蛋白质含量在0～1000μg范围内，蛋白质一色素结合物在 595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用比色法测定。
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2楼2012-02-20 15:14:31
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普通回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不可以测谷胱甘肽GSH的含量
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3楼2012-02-20 20:09:59
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wangwt05

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by yang0071 at 2012-02-20 15:14:31:
考马斯亮蓝G－250是一种染料，在游离状态下呈红色，当它与蛋白质结合后变为青色。蛋白质含量在0～1000μg范围内，蛋白质一色素结合物在 595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用比色法测定。

与蛋白里的什么基团结合？多肽和蛋白都是氨基酸组成的，为什么不能结合多肽显色？
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4楼2012-02-20 20:27:42
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鼓浪听涛

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
利用考马斯亮兰分子上的芳香苯环，与蛋白质的疏水区结合；同时其亚硫酸基团(一so3 一)与蛋白质的正电荷结合，可使蛋白质染出兰色条带。
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5楼2012-02-22 11:33:56
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wangwt05

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 鼓浪听涛 at 2012-02-22 11:33:56:
利用考马斯亮兰分子上的芳香苯环，与蛋白质的疏水区结合；同时其亚硫酸基团(一so3 一)与蛋白质的正电荷结合，可使蛋白质染出兰色条带。

谢谢！
另外，我想问的是，假设大分子蛋白质里的疏水区都是按比例增加的？越大的蛋白含有越多的疏水区，从而定量的与更多的考马斯亮蓝分子结合？所以可以以此来测量蛋白质的质量？
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6楼2012-02-22 18:35:19
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