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wangwt05

金虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝G250原理

请问考马斯亮蓝G250测蛋白质量的原理是什么?和蛋白质中的什么基团结合?

可以用这个方法测谷胱甘肽GSH的含量吗?
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助! 2012-02-20 19:39:27
考马斯亮蓝G-250是一种染料,在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质一色素结合物在 595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法测定。
2楼2012-02-20 15:14:31
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不可以测谷胱甘肽GSH的含量
3楼2012-02-20 20:09:59
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wangwt05

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by yang0071 at 2012-02-20 15:14:31:
考马斯亮蓝G-250是一种染料,在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质一色素结合物在 595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法测定。

与蛋白里的什么基团结合?多肽和蛋白都是氨基酸组成的,为什么不能结合多肽显色?
4楼2012-02-20 20:27:42
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鼓浪听涛

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
利用考马斯亮兰分子上的芳香苯环,与蛋白质的疏水区结合;同时其亚硫酸基团(一so3 一)与蛋白质的正电荷结合,可使蛋白质染出兰色条带。
5楼2012-02-22 11:33:56
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wangwt05

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 鼓浪听涛 at 2012-02-22 11:33:56:
利用考马斯亮兰分子上的芳香苯环,与蛋白质的疏水区结合;同时其亚硫酸基团(一so3 一)与蛋白质的正电荷结合,可使蛋白质染出兰色条带。

谢谢!
另外,我想问的是,假设大分子蛋白质里的疏水区都是按比例增加的?越大的蛋白含有越多的疏水区,从而定量的与更多的考马斯亮蓝分子结合?所以可以以此来测量蛋白质的质量?
6楼2012-02-22 18:35:19
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