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千里幽寻

金虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白

考马斯亮蓝:100mg G250+50ml 95%乙醇+100ml磷酸,定容1000ml ,抽滤
标准蛋白:  0.5mgSBA,定容至500ml

标准曲线方法:
                                          0             1            2           3          4        5   
蛋白添加量(0.1mg/ml)        0            0.2         0.4       0.6        0.8       1.0   (ml)
       水     (ml)                  1            0.8         0.6      0.4         0.2       0
考马斯亮蓝(ml)                  4             4            4         4            4         4
每个浓度做三个平行
测出来的吸光度如果不算零点,R*2值很高,可是如果加上零点的话,差别很大啊。下面是图

帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白
带零点.jpg


帮忙看看哪里出问题了···考马斯亮蓝法测蛋白-1
无零点.jpg
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薛大大

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
likedong1021: 金币+1, 应助指数+1, 谢谢回帖交流 2014-03-18 19:16:27
千里幽寻: 金币+10 2014-03-21 17:31:25
用bradford方法测标准曲线时,我们实验室都是用的96孔板 ,另外可以多做几个点,然后可以取舍,你只做5个点,可能误差比较大,一致后续试验都不够准确
7楼2014-03-18 15:02:44
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