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cassie小萍

新虫 (小有名气)

[求助] 镍柱纯化酶挂不上柱子 已有1人参与

我的是乙酰木聚糖酯酶,用镍柱纯化时挂不上柱子。将粗酶液、过柱子后的酶液、wash buffer第一遍洗过的流出液、wash buffer第二遍洗过的流出液、Elution buffer洗脱的纯酶液跑SDS-PAGE,显示粗酶液和过柱子后的酶液有条带,其他没条带,也就是说没有纯化出来,可能什么原因呢?是不是要把粗酶液先浓缩一下再过柱子才可能纯化出来?
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biology-girl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的柱子 是新的 还是旧的? 如果是旧的 建议你重生以后 再试试,一般柱子的寿命就是二十次左右。
2楼2014-06-16 09:35:16
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zhuyuta0

新虫 (初入文坛)

我的也是挂不上柱子,柱再生了效率也很低,不知道是标签没漏出来还是bingding buffer的原因,楼主租出了了吗?给点经验
3楼2019-03-16 15:54:27
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