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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 挑单克隆后摇菌摇不起来的问题
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 挑单克隆后摇菌摇不起来的问题 已有8人参与

做完转化，板子上长了单克隆好多，随机挑了10个，却都没摇起来。
以前师兄也遇到过是重新做的，我也正在重新做，但我想找到原因。
求原因。。
PS：抗生素等均未弄错。

还有，求助帖如何设置已完结？？？？
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1楼 2014-03-07 19:07:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
假阳性，我也不知道为什么，有时候也能遇到挑取10个有三四个摇不起来。同求答案。
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我不会！
4楼2014-03-07 21:22:00
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普通回帖

yanfang2012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有用PCR确认，确定没有假阳性？你说的没有摇起来是什么情况？菌液仍然清亮？
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believe yourself！
2楼2014-03-07 20:49:40
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是污染，假阳性菌也有可能，你可以用菌落PCR多筛些菌选择阳性菌再摇。再一个你多摇会，有些质粒拷贝少复制慢。
赞一下 回复此楼
hehe
3楼2014-03-07 21:08:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是感受态被杂菌污染，最好重新做转化

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-03-07 21:43:12
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踏实的心

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是抗性存在问题，我以前存在这种问题是抗性的原因
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6楼2014-03-07 21:54:55
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 踏实的心 at 2014-03-07 21:54:55
很有可能是抗性存在问题，我以前存在这种问题是抗性的原因

我这个抗性是amp的，板子和LB都是这个抗性。就是很奇怪摇不起来。
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7楼2014-03-07 22:05:01
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yanfang2012 at 2014-03-07 20:49:40
有没有用PCR确认，确定没有假阳性？你说的没有摇起来是什么情况？菌液仍然清亮？

是的，很清澈。没有PCR。
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8楼2014-03-07 22:24:31
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-07 21:08:23
是不是污染，假阳性菌也有可能，你可以用菌落PCR多筛些菌选择阳性菌再摇。再一个你多摇会，有些质粒拷贝少复制慢。

恩，我再摇过夜试试
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9楼2014-03-07 22:25:17
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-03-07 21:43:12
可能是感受态被杂菌污染，最好重新做转化

恩    同时已进行
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10楼2014-03-07 22:25:37
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