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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 挑单克隆后摇菌摇不起来的问题 已有8人参与

做完转化,板子上长了单克隆好多,随机挑了10个,却都没摇起来。
以前师兄也遇到过是重新做的,我也正在重新做,但我想找到原因。
求原因。。
PS:抗生素等均未弄错。

还有,求助帖如何设置已完结????
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
假阳性,我也不知道为什么,有时候也能遇到挑取10个有三四个摇不起来。同求答案。
我不会!
4楼2014-03-07 21:22:00
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普通回帖

yanfang2012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没有用PCR确认,确定没有假阳性?你说的没有摇起来是什么情况?菌液仍然清亮?
believe yourself!
2楼2014-03-07 20:49:40
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是污染,假阳性菌也有可能,你可以用菌落PCR多筛些菌选择阳性菌再摇。再一个你多摇会,有些质粒拷贝少复制慢。
hehe
3楼2014-03-07 21:08:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是感受态被杂菌污染,最好重新做转化

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-03-07 21:43:12
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踏实的心

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能是抗性存在问题,我以前存在这种问题是抗性的原因
6楼2014-03-07 21:54:55
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 踏实的心 at 2014-03-07 21:54:55
很有可能是抗性存在问题,我以前存在这种问题是抗性的原因

我这个抗性是amp的,板子和LB都是这个抗性。就是很奇怪摇不起来。
7楼2014-03-07 22:05:01
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yanfang2012 at 2014-03-07 20:49:40
有没有用PCR确认,确定没有假阳性?你说的没有摇起来是什么情况?菌液仍然清亮?

是的,很清澈。没有PCR。
8楼2014-03-07 22:24:31
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-07 21:08:23
是不是污染,假阳性菌也有可能,你可以用菌落PCR多筛些菌选择阳性菌再摇。再一个你多摇会,有些质粒拷贝少复制慢。

恩,我再摇过夜试试
9楼2014-03-07 22:25:17
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-03-07 21:43:12
可能是感受态被杂菌污染,最好重新做转化

恩    同时已进行
10楼2014-03-07 22:25:37
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