24小时热门版块排行榜    

查看: 3324  |  回复: 10

kirby13

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

雷杨琴

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, good 2012-04-16 23:07:53
你这实验做得太开放了。(1)甘油保存菌可以保存一年左右,但期间不能反复冻融,会对其造成巨大的伤害,活性会随着你反复冻融的次数呈指数级下降;建议最好一次多保存几管;(2)LB液体最好不要放太久了,现用现配灭菌最好;(3)紫外灭菌??紫外的穿透力很弱的,看有文献报道说隔了一层很薄的玻璃紫外都不能穿透,因此紫外灭菌仅能用于物体表面灭菌。(4)基本操作:将LB液体培养基、接种环、酒精灯放在超净工作台上,紫外灭菌半个小时,不开通风;再将带菌平板放入,用酒精棉球擦拭手,晾干后点燃酒精灯;将接种环烧红,特别是接口处要多烧一下;等其冷却几十秒后挑取单个菌落接种于液体培养基中,整个过程平板最好不要离火焰10cm外,完后同样要烧灼接种环;怎么拿平板需要你师兄或师姐教一下,多拿空平板试几次就熟练了。实验都是最基础的,慢慢就好了,孰能生巧!继续努力!
3楼2012-04-16 20:11:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, good 2012-04-16 23:07:44
没做过甘油菌这个菌种,但是大多数的菌种基本都是这样操作的。

如果培养基中没有添加缓冲液,最好还是测试下pH。

1.5g琼脂足够了,凝固度不高?会不会你太心急了,放在培养箱中过夜再用试试,同时可以判断有没有污染。

建议复苏的时候用TSB肉汤和TSA琼脂同时进行。

不太清楚这个无菌操作台,现在弄微生物都用生物安全柜,像你这种情况就用前照紫外(关闭通风),用时当然不能开紫外了,不开通风,点酒精灯,在火焰附近操作。
环境卫生、微生物学、卫生应急
2楼2012-04-16 10:51:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Joicesidy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
甘油保存菌种应该在零下70摄氏度保存,估计是你的菌种不行了
4楼2012-04-17 10:18:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

champions

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的1.5g琼脂的量是可以的,我们都加2%,不凝的原因可能跟你没调pH有关,过酸得得情况下会降低琼脂的凝固性,我们也遇到过划破平板的情况,原因是琼脂粉质量不好。 后面的问题不是很懂,不过你可以试着多活化几次。
5楼2012-04-17 20:05:00
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kirby13

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

6楼2012-04-27 21:44:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风雅月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.琼脂是日本琼脂还是国产的?不同厂家凝胶强度不同,日本的凝胶强度一般较高,倒平板时是否晃匀?
2.甘油保存菌种如果冻存操作步骤没问题的话4个月因该不会死,问题可能出在培养基上,3个多月时间太长。原则:禁止反复冻融。
3.平板应倒置培养,紫外灭菌时不能开风机,关紫外线后开风机20分钟以后再操作,超菌台可以放酒精灯,生物安全柜禁止放,酒精灯火焰向一边不影响操作,原则:操作在火焰10cm范围内。
7楼2012-04-28 09:42:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghaiyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、培养基不能凝固,估计是和你用的琼脂有关,PH不调一般也就是6-7之间,不会太低,如果PH很低会影响凝固的效果,琼脂的含量一般是1%-2@之间,所以你加的琼脂也在正常范围,一般我们就用日本产的,用量少、效果好,培养基的颜色也很好。你可以再试试加大琼脂的量,顺便也测PH值,以确定真是的影响因素。
2、甘油管一般要放置在-70度,而且不宜经常取用,活化的效果不好,一方面可能与你的培养基有关,另外就是你们做的甘油管的质量,如果之前用的没有问题,那就可能是反复的冻融使得菌体死亡。你可以将甘油管多选几种培养基试试,也可以将甘油管浓缩再用。
8楼2012-04-28 11:12:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxnly

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. 加入琼脂后一定要煮沸一下,然后再进行其他处理。你在配制的过程中没有煮沸,琼脂不是一个均匀的状态。如果按照你之前的方法,你容器底部那些培养基凝固度应该比较高。或者将培养基摇匀后再到平板,效果会好一些。
2. 隔夜培养之后如果澄清的话,我认为可以考虑再培养1到2d看看,因为菌株在冰箱内放置太久,生长速度可能会减慢。
3. 灭菌的时候只开紫外, 紫外可以杀菌,产生的臭氧也可以杀菌,杀菌结束后就需要开风了。
啊!我要毕业了……天!赐我一份工作吧!
9楼2012-04-28 18:43:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dajian007

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

10楼2012-08-27 17:01:06
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kirby13 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +3 简单点0 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:15 by wangjihu
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +4 share_joy 2026-03-16 4/200 2026-03-17 21:32 by hmn_wj
[考研] 304求调剂 +8 小熊joy 2026-03-14 8/400 2026-03-17 17:29 by ruiyingmiao
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 8/400 2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见