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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 青霉菌液体摇瓶培养为什么不长？
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Andyllk

银虫 (小有名气)

[求助] 青霉菌液体摇瓶培养为什么不长？

菌种：橘子上张的青霉（但是看孢子颜色是绿色的，不知道是不是绿霉）分离纯化几次后的平板纯种
液体培养基（摇瓶）：桔皮粉（橘子皮经烘干粉碎成的细粉）3%、豆粨粉2%、硫酸铵0.4%、水1000ml、pH自然。装液量40ml
培养条件：28°C、160r/min、摇床培养
培养时间：3-4d
现象：第一批装液量50ml，培养了两个星期，没有染菌现象，培养基浑浊而且没有像菌丝球类似的任何状态，就是黏黏的发酵液，没有异味，看不到是否有青霉的生长。
          第二批装液量40ml，培养了4天，依旧浑浊，液面和瓶壁接触的地方是通氧最好的部位但是依然看不到菌丝，发酵液有些浑浊，里面有很多褐色颗粒，老师说是豆粨粉颗粒，还说不好镜检，没有异味和染菌情况，但就是没又长出菌丝球和类似的状态。让我和老师百思不得其解
         想了好长时间就是找不到原因，请各位前辈指点迷津，稍时会上图，如果能解决问题的话，狂散金币，不胜感激！
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1楼2013-04-02 16:28:46
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！、 2013-05-16 22:59:13
培养基中粘度过大 ，有可能长不成菌丝球的形态，建议镜检看看或状物里面有没有菌丝，或者把培养过的放在培养箱静止培养  看看上面长不长。
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2楼2013-04-02 17:15:42
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Andyllk

银虫 (小有名气)
培养1d
点击[http://pinyin.cn/1AStjobbsUH] 查看这张图片。

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3楼2013-04-02 21:57:39
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Andyllk

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by microxy at 2013-04-02 17:15:42
培养基中粘度过大 ，有可能长不成菌丝球的形态，建议镜检看看或状物里面有没有菌丝，或者把培养过的放在培养箱静止培养  看看上面长不长。

发酵液太稠了，镜检是不是不好检测？
在形态上观察不出来长不长，除了镜检，有没有其他方法判断发酵液里有没有青霉？

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4楼2013-04-03 05:43:22
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最简单的方法就是静态培养，会在发酵液的上面长出青霉的气生菌丝和孢子的，很明显，你可以实验一下。你的问题估计是培养基粘度和接种量的问题，你是怎么接种的？
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5楼2013-04-03 08:18:10
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)
看图片应该改长菌了  但是不是很多
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6楼2013-04-03 08:19:12
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看照片感觉是有菌生长了。建议你摇一个有培养基不接菌的空瓶，一对照就知道长没长了。长了的话还是可以镜检的，我觉得不存在不好镜检的问题。
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7楼2013-04-03 12:44:38
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zhuchwei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助交流！ 2013-05-16 22:59:33
单看液体培养基的成分感觉营养少点，看图片的感觉是有菌的，只是生长不好，不知道你分离纯化用的培养基是不是和液体培养基一样的，如果是一样的且生长没问题，就不要考虑了，要不就考虑一下培养基的营养成分，pH这些条件
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8楼2013-04-05 12:28:50
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Andyllk

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by microxy at 2013-04-03 08:18:10
最简单的方法就是静态培养，会在发酵液的上面长出青霉的气生菌丝和孢子的，很明显，你可以实验一下。你的问题估计是培养基粘度和接种量的问题，你是怎么接种的？

平板里张出的青霉纯种，我用接种针直接挑取上面的菌丝块，大约1cm3左右，每个接了一块，带了点培养基，选的都是孢子和菌丝都有的菌丝块

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9楼2013-04-05 16:51:04
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Andyllk

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhuchwei at 2013-04-05 12:28:50
单看液体培养基的成分感觉营养少点，看图片的感觉是有菌的，只是生长不好，不知道你分离纯化用的培养基是不是和液体培养基一样的，如果是一样的且生长没问题，就不要考虑了，要不就考虑一下培养基的营养成分，pH这些 ...

分离纯化用的培养基是PDA，液体培养基不是，这些瓶的培养基成分都相同，温度，转速都是一样的，就是初始PH没有控制，但是今天长了一瓶，我看了是白色的菌丝球，稍后上图，但是不知为什么其他的瓶还是老样子

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10楼2013-04-05 18:09:14
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