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查看: 2014  |  回复: 18

Andyllk

银虫 (小有名气)

[求助] 青霉菌液体摇瓶培养为什么不长?

菌种:橘子上张的青霉(但是看孢子颜色是绿色的,不知道是不是绿霉)分离纯化几次后的平板纯种
液体培养基(摇瓶):桔皮粉(橘子皮经烘干粉碎成的细粉)3%、豆粨粉2%、硫酸铵0.4%、水1000ml、pH自然。装液量40ml
培养条件:28°C、160r/min、摇床培养
培养时间:3-4d
现象:第一批装液量50ml,培养了两个星期,没有染菌现象,培养基浑浊而且没有像菌丝球类似的任何状态,就是黏黏的发酵液,没有异味,看不到是否有青霉的生长。
          第二批装液量40ml,培养了4天,依旧浑浊,液面和瓶壁接触的地方是通氧最好的部位但是依然看不到菌丝,发酵液有些浑浊,里面有很多褐色颗粒,老师说是豆粨粉颗粒,还说不好镜检,没有异味和染菌情况,但就是没又长出菌丝球和类似的状态。让我和老师百思不得其解
         想了好长时间就是找不到原因,请各位前辈指点迷津,稍时会上图,如果能解决问题的话,狂散金币,不胜感激!
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助!、 2013-05-16 22:59:13
培养基中粘度过大 ,有可能长不成菌丝球的形态,建议镜检看看或状物里面有没有菌丝,或者把培养过的放在培养箱静止培养  看看上面长不长。
2楼2013-04-02 17:15:42
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Andyllk

银虫 (小有名气)

培养1d
点击[http://pinyin.cn/1AStjobbsUH] 查看这张图片。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-04-02 21:57:39
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Andyllk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by microxy at 2013-04-02 17:15:42
培养基中粘度过大 ,有可能长不成菌丝球的形态,建议镜检看看或状物里面有没有菌丝,或者把培养过的放在培养箱静止培养  看看上面长不长。

发酵液太稠了,镜检是不是不好检测?
在形态上观察不出来长不长,除了镜检,有没有其他方法判断发酵液里有没有青霉?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-04-03 05:43:22
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最简单的方法就是静态培养,会在发酵液的上面长出青霉的气生菌丝和孢子的,很明显,你可以实验一下。你的问题估计是培养基粘度和接种量的问题,你是怎么接种的?
5楼2013-04-03 08:18:10
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)

看图片应该改长菌了  但是不是很多
6楼2013-04-03 08:19:12
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看照片感觉是有菌生长了。建议你摇一个有培养基不接菌的空瓶,一对照就知道长没长了。长了的话还是可以镜检的,我觉得不存在不好镜检的问题。
7楼2013-04-03 12:44:38
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zhuchwei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助交流! 2013-05-16 22:59:33
单看液体培养基的成分感觉营养少点,看图片的感觉是有菌的,只是生长不好,不知道你分离纯化用的培养基是不是和液体培养基一样的,如果是一样的且生长没问题,就不要考虑了,要不就考虑一下培养基的营养成分,pH这些条件
8楼2013-04-05 12:28:50
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Andyllk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by microxy at 2013-04-03 08:18:10
最简单的方法就是静态培养,会在发酵液的上面长出青霉的气生菌丝和孢子的,很明显,你可以实验一下。你的问题估计是培养基粘度和接种量的问题,你是怎么接种的?

平板里张出的青霉纯种,我用接种针直接挑取上面的菌丝块,大约1cm3左右,每个接了一块,带了点培养基,选的都是孢子和菌丝都有的菌丝块

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2013-04-05 16:51:04
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Andyllk

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by zhuchwei at 2013-04-05 12:28:50
单看液体培养基的成分感觉营养少点,看图片的感觉是有菌的,只是生长不好,不知道你分离纯化用的培养基是不是和液体培养基一样的,如果是一样的且生长没问题,就不要考虑了,要不就考虑一下培养基的营养成分,pH这些 ...

分离纯化用的培养基是PDA,液体培养基不是,这些瓶的培养基成分都相同,温度,转速都是一样的,就是初始PH没有控制,但是今天长了一瓶,我看了是白色的菌丝球,稍后上图,但是不知为什么其他的瓶还是老样子

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2013-04-05 18:09:14
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