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蛋白纯化不出！急！已有1人参与
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最近在纯化一种蛋白，并且是一定要纯化出来的。大小事57KD 分别试了MBP,GST,HIS,标签，都不行，其中带有His标签的pRSETA载体，转入到rosetta中涂LB+氨苄+氯霉素板不长，摇菌也摇不起来， 1，有没有人知道是什么原因 后转入到BL21中，做了菌落PCR，选择大小正确的摇菌，但蛋白跑胶显示没有表达，elution buffer 和 beads中都什么都没有，2，这是什么情况呢 3，之前用MBP和GST标签表达时，显示诱导不明显，有什么好的办法吗 此外，还能提供一些什么建议吗，好用的载体什么的，万分感谢！急！……我是新手，好不容易攒了5个金币，希望得到靠谱的答案，拜托啦！ |
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