| 查看: 1462 | 回复: 7 | ||
[求助]
C41表达重组蛋白 已有2人参与
|
| 之前用pET28a连了个基因，在BL21表达，但是基本都是包涵体，这次换了C41，把之前的重组载体转进去，发现根本不长！！！想知道怎么回事，求大神指导！跪谢~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有290人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 重组蛋白与抗体的选择
已经有6人回复
- 我的蛋白在大肠杆菌中表达量低怎么办？
已经有7人回复
- 带GFP的重组表达载体，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白？
已经有20人回复
- Chem. Soc. Rev最新综述-杨志谋：重组蛋白交联水凝胶(附相关Science 2篇)
已经有92人回复
- 大唱杆菌JM109表达我的重组菌，无法表达怎么办
已经有10人回复
- 欲检测重组蛋白能否被磷酸化
已经有5人回复
- pMAL载体表达重组蛋白
已经有14人回复
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- 关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况
已经有17人回复
- 怎样把strep标签加到重组蛋白的C端
已经有3人回复
- 组氨酸标签重组蛋白纯化
已经有10人回复
- 重组蛋白前面会不会有其他的氨基酸残基
已经有11人回复
- 大规模培养细菌或细胞，表达重组蛋白等的童靴可以进来看看哦
已经有13人回复
- 重组蛋白结合不到ni柱上
已经有24人回复
- 关于蛋白重组表达的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】重组菌表达蛋白量如何测定？
已经有5人回复
- 【求助/交流】重组蛋白融合标签的选择
已经有6人回复
- 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化？
已经有14人回复
2楼2014-03-04 12:28:42
3楼2014-03-07 09:05:40
4楼2014-03-07 10:37:46
5楼2014-03-10 22:10:24
【答案】应助回帖
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-11 13:34:36
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-11 13:34:36
|
看你是做结构的，你优化的目的应该是得到可溶表达 首先你应该大致的分析一下导致包涵体的原因 C41宿主菌主要是用来表达有毒蛋白和膜蛋白的，如果你的蛋白不属于这些类型，C41宿主的帮助不大 Origami宿主菌是氧化型的胞内环境，主要用于带有二硫键蛋白的表达，有助于形成正确的二硫键 你说到基本上全是包涵体，意味着可能还有一小部分的胞质，如果有的话，建议首先尝试降低表达温度，总体来说，温度对增加胞质的贡献最大。 如果没有宿主菌可以选择，可以尝试更换载体，融合表达，或者优化培养基（加入甘油、甜菜碱等会有些帮助的） 最后，也可以考虑一下变复性 |
6楼2014-03-11 13:09:02
7楼2014-05-08 10:09:00
xuexitiandi
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 781.5
- 散金: 392
- 红花: 1
- 帖子: 421
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 3620061
- 注册: 2014-12-30
- 性别: GG
- 专业: 宇宙学
8楼2017-01-07 17:15:43
