应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 空质粒可以转化如目的菌中，加入目的片段后怎么也转化不进去
111/2返回列表12下一页
查看: 2467  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

werty1245

新虫 (初入文坛)

[求助] 空质粒可以转化如目的菌中，加入目的片段后怎么也转化不进去 已有5人参与

最近一直做电转化，空质粒可以转化入目的菌中，但是质粒双酶切连接目的片段后怎么也转化不进去。
各位大神，救救小女子吧~~~实验一直卡在这里
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-03 14:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyshpy007

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
werty1245(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-03-03 18:35:54
本帖内容被屏蔽
2楼2014-03-03 16:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werty1245

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyshpy007 at 2014-03-03 16:14:01
为何不试试其他转化方式，或者装入的片段对菌株有毒性？

因为目的菌是革兰氏阳性菌，用电转化的转化效率要高一些。另外，怎么判断装入的片段是否对菌株有毒性
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-04 08:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu208xj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
werty1245(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-05 11:46:46
1)空质粒能转入，证明这个质粒能在细胞中稳定存在；
2）可以用诱导启动子去证明毒性
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-05 10:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werty1245

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liu208xj at 2014-03-05 10:10:31
1)空质粒能转入，证明这个质粒能在细胞中稳定存在；
2）可以用诱导启动子去证明毒性

可以说明白一些不？我不明白怎么用诱导启动子证明毒性，万分感谢
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-05 20:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确保连好目的片段。你的载体连不上目的片段，转化也不出。再一个你的目的片段是否含有ccdB这类自杀基因。
赞一下 回复此楼
hehe
6楼2014-03-05 21:04:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werty1245

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-05 21:04:06
你确保连好目的片段。你的载体连不上目的片段，转化也不出。再一个你的目的片段是否含有ccdB这类自杀基因。

我确定已经连接上了，酶切、测序结果都对。目的片段里不含有自杀基因
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-06 09:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

是奔跑

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不知道你现在解决这问题了吗？我现在也是卡在这电转化这里
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-28 11:14:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu208xj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by werty1245 at 2014-03-05 20:25:06
可以说明白一些不？我不明白怎么用诱导启动子证明毒性，万分感谢...

你的是什么载体，是诱导型表达载体吗？还是克隆载体？
赞一下 回复此楼
9楼2015-08-26 08:39:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

535390882

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看看载体上你的目的基因有没有启动子。有的话就要看看这个启动子能不能在宿主菌里面表达。可以的话那就可能是蛋白具有毒性，这种情况下建议更换载体。
赞一下 回复此楼
10楼2015-08-26 11:14:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 werty1245 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求调剂 +4 来好运来来来 2026-03-22 4/200 2026-03-22 12:43 by 素颜倾城1988
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸！ 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭