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zc10917金虫 (正式写手)
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昨日第一次跑胶,只做了分离胶,没弄浓缩胶,师姐表示不知道怎么灌浓缩胶,望给位前辈指导,有视频啥的最好了。 跑胶的条件是12% page 100v跑了1小时(溴酚蓝没变一条线),然后380v跑到底 不管怎么说跑了一块胶,用CBB染色,过夜,不过早上有点事中午才来收。估计染了15个小时吧, 是不是太长了,总之结果是感觉胶明显变小了. 然后脱色,能够看到有条带。我加的样品中只含BSA(分子量66kd),上样量大概是1微克,蛋白预先在含有DTT的上样缓冲中95℃反应5分钟。 条带有两个问题:1 条带位置离上样口很近 2 条带不是直线而是折线 今天做的和昨天差不多, 但感觉胶很容易碎 不知道是什么回事 希望各位前辈给予指导 |
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