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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 求助各位大侠，为什么琼脂糖电泳出现这种情况 ？
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yyang628

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助各位大侠，为什么琼脂糖电泳出现这种情况 ？ 已有4人参与

小弟做DNA电泳，最亮的那条条带不知道为什么会出现这种形状？我的上样量为25ul,上样量不大，我想应该不会是上样量的原因这是问题之一。问题之二是：在第二个上样孔中加了DNA和loading buffer，但是问什么跑出来之后DNA消失了。这一DNA的分子量比边上的大，不存在跑出胶体这一说法。请各位大侠赐教！
求助各位大侠，为什么琼脂糖电泳出现这种情况 ？
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1楼 2014-02-28 10:25:26
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小月亮1990

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-28 11:46:46
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 15:50:41
初步怀疑是胶没有配好，可能有气泡，出现了弧形。DNA也不见得是消失了，好像模糊的有弥散的条带，可能是浓度太低了。建议，再配一块质量的胶吧，重新跑一下，因为MARKER 跑得也不好看。
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加油
2楼2014-02-28 10:42:36
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:46:50
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:04
很明显是胶做的不好，建议胶做好了再跑，marker就没跑好。。。。可以反复加热几次，冷却到一定温度再倒胶
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-02-28 11:16:40
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:13
上样量根据你梳孔而定，你能上样25μl，说明梳孔很大，如果Marker上样很少而且没有沉降均匀也可能跑不好。成这个样子，个人认为还是胶没有做好。
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学习使你立于不败之地
4楼2014-02-28 16:05:59
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yyang628

银虫 (初入文坛)
好的，谢谢大家，周末愉快！明天再试试
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5楼2014-02-28 20:16:36
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yyang628: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:21
胶做的不好，重新换些TAE再做次胶把胶槽的TAE也换了。
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hehe
6楼2014-02-28 20:32:35
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yyang628

银虫 (初入文坛)
谢谢大家的关心，每人都给几个金币，表示一下谢意，小弟的金币也不多。周末愉快！
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7楼2014-03-02 16:14:25
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winner00lk

铜虫 (小有名气)
说实话，我大家回复的片面了，如果是单纯的胶没做好，只能解释靠近MAKER的孔为什么跑变形了。而楼主提到的第二个问题：即最左边的胶孔没有条带问题，没有答复。从图上看，引物二聚体和指示剂条带明显，推算楼主应该是PCR产物跑胶，最左边的是扩增失败的，所以看不到条带，即使怎么配胶也还是没有条带；MAKER跑的痕迹看，胶块在电泳仪里漂动，导致跑偏了，也有可能是样品跑走形的原因
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我从远方来，没带走一丝遗憾
8楼2014-03-07 15:12:58
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