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yyang628

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助各位大侠,为什么琼脂糖电泳出现这种情况 ? 已有4人参与

小弟做DNA电泳,最亮的那条条带不知道为什么会出现这种形状?我的上样量为25ul,上样量不大,我想应该不会是上样量的原因这是问题之一。问题之二是:在第二个上样孔中加了DNA和loading buffer,但是问什么跑出来之后DNA消失了。这一DNA的分子量比边上的大,不存在跑出胶体这一说法。请各位大侠赐教!
求助各位大侠,为什么琼脂糖电泳出现这种情况 ?
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小月亮1990

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-28 11:46:46
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 15:50:41
初步怀疑是胶没有配好,可能有气泡,出现了弧形。DNA也不见得是消失了,好像模糊的有弥散的条带,可能是浓度太低了。建议,再配一块质量的胶吧,重新跑一下,因为MARKER 跑得也不好看。
加油
2楼2014-02-28 10:42:36
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:46:50
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:04
很明显是胶做的不好,建议胶做好了再跑,marker就没跑好。。。。可以反复加热几次,冷却到一定温度再倒胶
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
3楼2014-02-28 11:16:40
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yyang628: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:13
上样量根据你梳孔而定,你能上样25μl,说明梳孔很大,如果Marker上样很少而且没有沉降均匀也可能跑不好。成这个样子,个人认为还是胶没有做好。
学习使你立于不败之地
4楼2014-02-28 16:05:59
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yyang628

银虫 (初入文坛)

好的,谢谢大家,周末愉快!明天再试试
5楼2014-02-28 20:16:36
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yyang628: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-03-02 16:13:21
胶做的不好,重新换些TAE再做次胶把胶槽的TAE也换了。
hehe
6楼2014-02-28 20:32:35
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yyang628

银虫 (初入文坛)

谢谢大家的关心,每人都给几个金币,表示一下谢意,小弟的金币也不多。周末愉快!
7楼2014-03-02 16:14:25
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winner00lk

铜虫 (小有名气)

说实话,我大家回复的片面了,如果是单纯的胶没做好,只能解释靠近MAKER的孔为什么跑变形了。而楼主提到的第二个问题:即最左边的胶孔没有条带问题,没有答复。从图上看,引物二聚体和指示剂条带明显,推算楼主应该是PCR产物跑胶,最左边的是扩增失败的,所以看不到条带,即使怎么配胶也还是没有条带;MAKER跑的痕迹看,胶块在电泳仪里漂动,导致跑偏了,也有可能是样品跑走形的原因
我从远方来,没带走一丝遗憾
8楼2014-03-07 15:12:58
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