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lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于PCR中测RNA完整性的琼脂糖变性凝胶电泳实验 已有4人参与

最近要做QRTPCR,RNA提取后想测下RNA完整性,RNA琼脂糖变性凝胶电泳实验的方案搜索了很多用TAE TBE MOPS缓冲液的都有。筒子们谁做过,能提供给一份详细点的试验流程的,万分感谢啊
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tangqing小木

金虫 (初入文坛)


lanlvmaomao(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-02-28 22:01:08
引用回帖:
8楼: Originally posted by lanlvmaomao at 2014-02-27 21:41:55
非常感谢,我想用TEB也没什么关系吧...

正规做RNA电泳应该使用MOPS缓冲液(含甲醛),而且所有的器具需用DEPC水处理,以防RNA降解,MOPS不贵,如果需要可参照分子克隆实验指南自己配制。如果RNA电泳只是观察RNA是否完整,以后实验需要,用普通跑胶也能出来,就是用TBE了,我们也做过,没问题,注意器具一般清洁,跑胶时间不要太长,可以的,用1.5%的胶。
9楼2014-02-28 09:13:23
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yyshpy007

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-27 11:00:16
本帖内容被屏蔽

2楼2014-02-27 02:38:54
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励交流 2014-02-28 22:02:53
正如楼上所说,的确是跟跑DNA是一样的,配1.5%左右的胶,用1X TAE跑就可以了
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-02-27 11:00:10
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气


lanlvmaomao(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-02-28 22:02:24
....
    最标准的是用甲醛变性电泳,如果嫌麻烦,就用普通TAE/TBE琼脂糖电泳就成了,主要注意清洗好槽子、梳子制胶盒等,一般是拿高浓度NaOH来泡,DEPC水冲
Let God do with it as He wills
4楼2014-02-27 13:02:10
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