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从氨基酸序列到基因克隆 已有5人参与
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求助各位高人，本人对分子一无所知，不料却被领导要求写东西，被搞得晕头转向，文献也看不明白。 我的设想是分离出的一种肽类活性物质，通过edman降解获得氨基酸序列，然后怎么样通过获得的氨基酸序列得到这种物质的基因呢（假设搜索不到什么同源序列之类的）？具体采取什么技术方法？ 我只大概的知道要设计引物，用RACE获得全长。其余的具体怎么描述啊？ 拜托大家帮帮忙。。。。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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050605044
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5楼2014-02-07 16:33:43
RXMCDM
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2楼2014-02-07 02:05:00
【答案】应助回帖
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如果不对目标蛋白的基因进行研究，只要得到表达蛋白的基因，可以人工合成基因。如果要克隆到原基因，可以考虑根据测到的蛋白序列设计简并引物，对Oligo(dT)反转录的cDNA文库进行PCR扩增。根据提取的蛋白大小估计PCR扩增片段的大小，测序鉴定。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
3楼2014-02-07 10:31:31
4楼2014-02-07 15:59:33
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