版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 6993.4
散金: 181
红花: 3
帖子: 412
在线: 92.7小时
虫号: 2628224
注册: 2013-09-01
性别: GG
专业: 作物分子育种

[求助] 关于PCR扩不出的问题，求大神解答已有5人参与

大家好：我现在PCR的时候遇到了一个问题，我根据小麦转录组测序的结果，想设计几对引物做荧光定量，扩增长度大约100bp左右。但是，我想先用基因组DNA，用普通的PCR仪摸一下条件，却怎么也扩不出目的带（只有模糊的引物带），用touchdown程序也不行。用cDNA直接荧光定量更是定不出来，可我设计引物的时候都尽量避开了引物二聚体或者错配，这是咋回事啊？求大神解答，着急啊

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有246人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

反转录PCR一直P不出来，求助已经有6人回复
反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。已经有8人回复
大神请留步！！！长片段ＰＣＲ扩增！！！已经有5人回复
PCR引物设计问题，求教大神~ 已经有11人回复
PCR重复不出来已经有7人回复
PCR扩增不出目的条带已经有12人回复
质粒ＰＣＲ扩不出目的条带，且有杂带，但是直接测序有结果？为什么？？？？？已经有7人回复
PCR回收产物做PCR模板，为什么扩不出来已经有8人回复
PCR重复不出来已经有20人回复
PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？已经有4人回复
overlap PCR做不出来呐。。。。已经有23人回复
pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整已经有13人回复
PCR一直扩不出目的条带已经有10人回复
PCR扩增不出条带已经有9人回复
PCR扩不出目的基因已经有14人回复
cDNA做普通PCR扩不出条带来已经有13人回复
求助PCR老是跑不出条带已经有16人回复
PCR跑不出目的片段已经有6人回复
求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？已经有24人回复
【求助/交流】菌落PCR扩出来的片段不是目的片段，咋办啊？？？？已经有9人回复
【求助/交流】热不对称PCR的问题，回帖就送金币！！多谢帮忙回答的，帮顶的！！已经有49人回复

1楼2014-01-24 13:04:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 363 (硕士)
金币: 7752.3
散金: 15
红花: 9
帖子: 751
在线: 188.2小时
虫号: 819723
注册: 2009-07-31
性别: GG
专业: 植物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-25 04:02:14
lwk5716: 金币+1, ★有帮助 2014-01-28 15:51:32

你是根据cDNA序列设计的引物有可能在gDNA上不工作。你可以先用引物在你cDNA上做一下普通PCR，同时多设计几对引物，毕竟定量引物工作要求比较高。

赞一下(1人)

hehe

5楼2014-01-24 19:46:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 lwk5716 的主题更新