24小时热门版块排行榜    

查看: 1225  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

[求助] 关于16S细菌鉴定中的问题 已有2人参与

各位虫友,本人做16SrDNA细菌学鉴定,使用修改后的CTAB和酚氯仿组合方法提取,然后使用27F/1492R引物PCR扩增,以前用此方法都是批量进行DNA提取和分析,偶尔当然会有一两个不出来,但是最近遇到的一批菌,在LB上生长很好,但是用此方法却始终无法提取16SrDNA或是PCR无产物,无法分析,操作程序未发生改变,然后参考一些其他人提取DNA的方法也没有得到PCR产物,不知道是什么原因?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

兴趣是第一导师,我爱它,因此我毫无疲倦的探索
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 阿督嘎 at 2014-04-01 08:43:32
有没有排除是pcr反应体系的试剂有问题呢?以前有人遇到类似问题,一个多月p不出东西,原来是试剂被污染了。。。

应该不是PCR反应体系的问题  以前都用的这种体系和试剂  估计是没有抽提得到模板DNA   下次考虑加上阳性对照菌株试试
兴趣是第一导师,我爱它,因此我毫无疲倦的探索
7楼2014-04-06 14:38:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

lulina1211

铜虫 (初入文坛)

请问引物选择的依据是什么?怎么选择引物?
加油,坚持!等待!相信自己!谦逊!
2楼2014-03-26 10:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

一般细菌鉴定都使用通用引物,当然如果你做其他分子生物学实验引物是根据需要设计的,有专门软件

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
兴趣是第一导师,我爱它,因此我毫无疲倦的探索
3楼2014-03-31 15:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bikexmx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你提取的基因组DNA的量多吗?要是量很多最好是将基因组DNA模板稀释后再PCR
前方总有更多挑战,战胜恐惧,勇往向前,加油~~~~
4楼2014-04-01 08:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 4/200 2026-08-30 16:03 by sundiv
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 07:05 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 06:00 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
信息提示
请填处理意见