24小时热门版块排行榜

返回列表

本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看

qiaolinkun

银虫 (小有名气)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 407.2
散金: 2
帖子: 166
在线: 17.4小时
虫号: 787065
注册: 2009-06-04
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 菌种鉴定的问题

本人刚刚开始做微生物菌种鉴定，把细菌总DNA提取出来后PCR 胶回收获得纯16SDNA 可以直接测序么？为什么还要转到感受态细胞（一口爱DH5α）里去筛选阳性菌呢？两者测序结果会有多大差异？

回复此楼

» 猜你喜欢

真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗已经有6人回复
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。已经有3人回复
孩子确诊有中度注意力缺陷已经有14人回复
三甲基碘化亚砜的氧化反应已经有4人回复
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢已经有5人回复
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗已经有5人回复
2025冷门绝学什么时候出结果已经有3人回复
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入已经有4人回复
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生已经有6人回复
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？已经有3人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

镰刀菌种的鉴定已经有10人回复
菌种鉴定怎样选取培养基已经有6人回复
①Dyella marensis为何菌？②Biolog菌种鉴定问题。已经有6人回复
【求助/交流】哪里可以做细菌菌种鉴定？已经有16人回复
【求助/交流】菌种鉴定问题已经有16人回复
【求助/交流】微生物发酵过程中出现的问题已经有20人回复
【求助/交流】关于16srRNA菌种鉴定问题已经有14人回复
【求助/交流】关于菌种分离纯化问题已经有16人回复
【求助/交流】关于系统发育树，如何鉴定菌种已经有12人回复
【求助/交流】甘油菌的问题已经有11人回复

1楼2012-08-19 11:35:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖置顶 ( 共有1个 )

雨伞

金虫 (小有名气)

MicEPI: 1
应助: 8 (幼儿园)
金币: 1417.4
散金: 59
帖子: 123
在线: 20.2小时
虫号: 1613034
注册: 2012-02-12
专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiaolinkun: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2012-08-20 07:06:07
zhang8826857: 金币+1, MicEPI+1, lz给了这么高的评价，授予epi一枚 2012-08-22 16:03:09

直接和你说吧，测序的原理你自己要弄清楚！找书看吧，测序公司拿回去也是和你做PCR的原理差不多。PCR产物测序易出现双峰，所以你的试剂和PCR操作一定要过关，有杂菌污染测序结果可能就会出问题了，但是，操作过关看一个大概结果也可以将PCR产物直接测序，只是测得的前几十个碱基是不准确的。而做一个克隆就不会出现这些问题，一个载体一般连一个PCR片段，一个转化子只能含有一个这样含目的片段的载体（同种质粒不相容），挑单菌落测序应该测的单一结果的，而且这样测序你用的是载体上的引物测序，而非16S引物，这样得到了完整而准确的16S序列。