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a770992409

新虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR的基础问题 已有4人参与

请教一下:1.PCR中引物是不是不能和poly A的模板结合?如果用的是taq 酶,poly A模板的AAAA……A会不会被切掉?
                  2.如果参考文献的方法要得到的双链不一样长(类似于有粘性末端),怎么证明我得到了这样双链产物?
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a770992409

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by m602010145 at 2014-01-06 13:24:26
这个问题太2

104除以2等于多少?这么2的问题你怎么回答不出来?
8楼2014-01-07 01:38:05
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查看全部 14 个回答

a770992409

新虫 (小有名气)

只有机器人回答我的帖子吗,好凄凉
2楼2014-01-05 16:05:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-05 18:43:50
1. 如果你设计引物为oligoT,就可以与polyA模板结合了。没听说Taq酶有外切功能。
2. 好像没有听说可以得到不一样的长的双链。除非你只做一个循环。
3楼2014-01-05 18:04:59
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gyl121

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-07 10:28:17
楼主啊,你这个问题有点不太明了
1.poly A模板没有这个吧,在DNA中有AAAAA的序列的话,你可以配对的设计,但是必然会形成引物二聚体的
   同时,POLYA是后期加上去的,如果你是用CDNA,那你是去掉这个结构的
2.如果双链不一样长,那个在DNA中也是看不到的,因为扩出来最多的是两引物的重复片段,所以不会出现,怎么样判定,我觉得你设计引物时将片段包括进去就可,酶切
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
4楼2014-01-05 21:04:42
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