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再见萤火虫89

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 作物分子育种

[求助] 反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。已有4人参与

反转录RNA，用得到的cDNA做了实时定量。cDNA的浓度结果都可以，260/280约为1.8，260/230约为2.2~2.38，浓度为1300~1500ng/ul.测浓度时的峰值也正常，只有260nm处有峰。但是，问题是，有的cDNA能正常扩增出内参基因，有的扩不出来。补充一下，内参没问题。这是什么原因啊？怎么解决啊？前辈们，请教。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

[ Last edited by 再见萤火虫89 on 2013-12-26 at 14:46 ]

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天助自助者。最喜欢的动画片之一《再见萤火虫》，又名《萤火虫之墓》

1楼 2013-12-26 13:03:14

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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 363 (硕士)
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红花: 9
帖子: 751
在线: 189.4小时
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性别: GG
专业: 植物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 21:00:24

我也碰到过类似情况，又重新反转合成cDNA。建议为了保证实验的可靠性再重新反转一下。

hehe

9楼2013-12-28 16:15:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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