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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】蛋白胶低分子量条带模糊,怎么办?? 已有5人参与

根据maker(从左边数第五条)来看,低分子量的条带都比较宽并且模糊,请问各位这是什么原因?应该如何改进?谢谢各位了
【求助】蛋白胶低分子量条带模糊,怎么办??
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小山店

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:25
提高蛋白浓度,也就是上样体积小;提高分离胶浓度;降低跑胶电压,同时放在冰上跑胶。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-12-20 00:53:58
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:29
小蛋白容易扩散,带比较宽。唯有marker的小分子带窄,可能是被样品排挤(蛋白质间相互排斥)
3楼2013-12-20 11:23:17
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:32
这个看起来好似是胶的原因,可能是胶凝固的时间短了点,造成下面的胶不如上面的胶均一等
生物化学与分子生物学
4楼2013-12-20 11:44:12
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dandelionlh

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:37
可以把胶配大一点,可能分子量小的蛋白它运动也较容易,因此不容易聚集吧。
5楼2013-12-20 19:35:58
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:41
我跑小分子蛋白从来都是这模样.要想看得清楚就只能多加点
用梯度胶会好很多,不过太贵了
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2013-12-21 01:11:05
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小山店 at 2013-12-20 00:53:58
提高蛋白浓度,也就是上样体积小;提高分离胶浓度;降低跑胶电压,同时放在冰上跑胶。

谢谢。我用的上层胶是5%,下层胶是15%,电压是由90V变到130V。不知道这样的浓度和电压是否需要改进?我会尝试一下在冰上跑胶,谢谢!
7楼2013-12-22 22:07:43
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-20 11:23:17
小蛋白容易扩散,带比较宽。唯有marker的小分子带窄,可能是被样品排挤(蛋白质间相互排斥)

谢谢回贴。那该如何处理呢?谢谢!
8楼2013-12-22 22:10:02
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-20 11:44:12
这个看起来好似是胶的原因,可能是胶凝固的时间短了点,造成下面的胶不如上面的胶均一等

谢谢回贴。我的下层胶一般放置2个小时,加入上层胶后在4度放过夜的。下层胶还需要增加放置时间吗?谢谢!
9楼2013-12-22 22:12:31
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-12-21 01:11:05
我跑小分子蛋白从来都是这模样.要想看得清楚就只能多加点
用梯度胶会好很多,不过太贵了

谢谢回贴,我会尝试多加一些,谢谢!
10楼2013-12-22 22:14:31
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