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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助】蛋白胶低分子量条带模糊，怎么办？？
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】蛋白胶低分子量条带模糊，怎么办？？ 已有5人参与

根据maker（从左边数第五条）来看，低分子量的条带都比较宽并且模糊，请问各位这是什么原因？应该如何改进？谢谢各位了
【求助】蛋白胶低分子量条带模糊，怎么办？？
图片.png
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1楼 2013-12-19 20:10:41
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小山店

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:25
提高蛋白浓度，也就是上样体积小；提高分离胶浓度；降低跑胶电压，同时放在冰上跑胶。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2013-12-20 00:53:58
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:29
小蛋白容易扩散，带比较宽。唯有marker的小分子带窄，可能是被样品排挤（蛋白质间相互排斥）
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3楼2013-12-20 11:23:17
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:32
这个看起来好似是胶的原因，可能是胶凝固的时间短了点，造成下面的胶不如上面的胶均一等
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生物化学与分子生物学
4楼2013-12-20 11:44:12
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dandelionlh

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:37
可以把胶配大一点，可能分子量小的蛋白它运动也较容易，因此不容易聚集吧。
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5楼2013-12-20 19:35:58
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-23 14:55:41
我跑小分子蛋白从来都是这模样.要想看得清楚就只能多加点
用梯度胶会好很多,不过太贵了
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2013-12-21 01:11:05
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小山店 at 2013-12-20 00:53:58
提高蛋白浓度，也就是上样体积小；提高分离胶浓度；降低跑胶电压，同时放在冰上跑胶。

谢谢。我用的上层胶是5%，下层胶是15%，电压是由90V变到130V。不知道这样的浓度和电压是否需要改进？我会尝试一下在冰上跑胶，谢谢！
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7楼2013-12-22 22:07:43
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-20 11:23:17
小蛋白容易扩散，带比较宽。唯有marker的小分子带窄，可能是被样品排挤（蛋白质间相互排斥）

谢谢回贴。那该如何处理呢？谢谢！
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8楼2013-12-22 22:10:02
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-20 11:44:12
这个看起来好似是胶的原因，可能是胶凝固的时间短了点，造成下面的胶不如上面的胶均一等

谢谢回贴。我的下层胶一般放置2个小时，加入上层胶后在4度放过夜的。下层胶还需要增加放置时间吗？谢谢！
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9楼2013-12-22 22:12:31
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一路向南_J

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-12-21 01:11:05
我跑小分子蛋白从来都是这模样.要想看得清楚就只能多加点
用梯度胶会好很多,不过太贵了

谢谢回贴，我会尝试多加一些，谢谢！
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10楼2013-12-22 22:14:31
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