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deer鹿鹿

铜虫 (初入文坛)

[求助] 分光光度计法测定脂氧合酶活性,求助! 已有1人参与

用下面方法配制的亚油酸底物溶液:
10mg亚麻酸,用无水乙醇溶解定容至 7mL,并加入0. 2 mL吐温-20,接着用旋转蒸发仪将乙醇蒸干。再用15 mL 0. 05 mol/L的Na2HPO4溶液溶解,为了保持底物溶液的澄清而用 1 mol/LNaOH溶液滴定至pH9. 0(但是我没有觉得出现过浑浊)最后用pH值为6.5,0. 2mol/L的磷酸缓冲液将其稀释10倍即为反应底物溶液。所得底物每3ml分装在离心管中,储藏在-20℃条件下备用。

配置好后,在用分光光度计测定时,在调零那步就出现问题。两个石英比色皿加入底物溶液和0.1ml缓冲液后,在234nm下读数很不稳定,在+0.1到-0.3范围内波动,无法调零。不知道为什么,但是在大于300nm条件下同样的底物溶液没有出现这样的情况。求大神解救!~

[ Last edited by 木虫/panda on 2014-5-21 at 22:32 ]
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lihaitao321

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 春光可饮 at 2014-05-21 19:28:56
这个我正在测,用这个方法感觉不太好

亲   你是用酶标仪测的吗    能分享下经验吗
无论是趴下,还是奔跑,生活一直都在继续着...
5楼2014-07-26 15:38:38
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juzi1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用一个杯试试,两个比色杯可能有差距。
2楼2013-11-27 21:47:05
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deer鹿鹿

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by juzi1 at 2013-11-27 21:47:05
用一个杯试试,两个比色杯可能有差距。

这个数值波动的问题我解决了,是我预实验的时候吐温20浓度有点高导致的,谢谢的回复与帮助!另外问下,这个酶你测过吗?
3楼2013-11-27 22:17:29
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春光可饮

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个我正在测,用这个方法感觉不太好
4楼2014-05-21 19:28:56
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