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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 紫外可见分光光度计法测定含量
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ivyasspring

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见分光光度计法测定含量

请问下使用紫外可见分光光度计法测定含量时在绘制标准曲线之后，如何求算试样的含量？
比如在求算多糖含量的时候，用葡萄糖绘制完标注曲线之后，如何计算多糖的含量？
含量（%）=C*D*F*100/w这个公式的字母代表什么呢？如何计算得到的？问题有点多，谢谢大家啦。
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1楼 2013-05-16 09:16:46
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ivyasspring: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-16 13:31:28
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数吧，C为测得样品溶液中葡萄糖的浓度(μg/ml)；D为样品溶液的稀释倍数；F为换算因素；W为多糖质量(μg)。
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2楼2013-05-16 09:41:22
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 09:41:22
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数 ...

嗯。是的。求糖的质量分数。
请问这个稀释倍数和换算因数是怎么求得的呢？
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3楼2013-05-16 09:48:29
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 09:41:22
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数 ...

W的值是测定时的质量，还是我一开始取的？比如我一开始取10mg，然后稀释分之成20微克/ml。这个W是哪一个？
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4楼2013-05-16 09:52:30
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ivyasspring: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢你的耐心解答哦，这方面刚接触不懂的很多，再遇到问题还希望你的帮助呢！ 2013-05-16 10:34:20
D是你配成供试品时，将它稀释的倍数，譬如：精密量取1mL，置于10mL容量瓶中，稀释到刻度，那它的稀释倍数就是10倍；W是你一开始取的量；F就是待测组分的摩尔质量与称量形式的摩尔质量之比，是个常数，在这里即F=多糖含量/多糖溶液中葡萄糖含量*稀释倍数。
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5楼2013-05-16 10:05:09
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 10:05:09
D是你配成供试品时，将它稀释的倍数，譬如：精密量取1mL，置于10mL容量瓶中，稀释到刻度，那它的稀释倍数就是10倍；W是你一开始取的量；F就是待测组分的摩尔质量与称量形式的摩尔质量之比，是个常数，在这里即F=多糖 ...

计算F时的多糖含量是哪一个？也是一开始取的吗？还是稀释后的溶液中所含有的？多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的吗？
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6楼2013-05-16 10:41:33
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ivyasspring at 2013-05-16 10:41:33
计算F时的多糖含量是哪一个？也是一开始取的吗？还是稀释后的溶液中所含有的？多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的吗？...

F中的多糖含量就是一开始取的值，多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的。如果是一个常数，应该可以查出来的，或者你试试找找。
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7楼2013-05-16 10:49:12
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 10:49:12
F中的多糖含量就是一开始取的值，多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的。如果是一个常数，应该可以查出来的，或者你试试找找。...

f应该是多糖的还是葡萄糖的？如果是葡萄糖的话，应该可以查到吧。
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8楼2013-05-16 13:34:40
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ivyasspring at 2013-05-16 13:34:40
f应该是多糖的还是葡萄糖的？如果是葡萄糖的话，应该可以查到吧。...

应该是多糖与葡萄糖之比。
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9楼2013-05-16 13:43:22
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 13:43:22
应该是多糖与葡萄糖之比。...

哦~
10楼2013-05-16 14:12:28
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