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ivyasspring

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见分光光度计法测定含量

请问下使用紫外可见分光光度计法测定含量时在绘制标准曲线之后,如何求算试样的含量?
比如在求算多糖含量的时候,用葡萄糖绘制完标注曲线之后,如何计算多糖的含量?
含量(%)=C*D*F*100/w这个公式的字母代表什么呢?如何计算得到的?问题有点多,谢谢大家啦。
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ivyasspring: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-16 13:31:28
楼主,通常是标准曲线与供试品同时测定,通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的,紫外吸收可以测出来,那就可以形成一条标准曲线(相关因子r至少要0.9998)。你的公式应该是求质量分数吧,C为测得样品溶液中葡萄糖的浓度(μg/ml);D为样品溶液的稀释倍数;F为换算因素;W为多糖质量(μg)。
2楼2013-05-16 09:41:22
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ivyasspring: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢你的耐心解答哦,这方面刚接触不懂的很多,再遇到问题还希望你的帮助呢! 2013-05-16 10:34:20
D是你配成供试品时,将它稀释的倍数,譬如:精密量取1mL,置于10mL容量瓶中,稀释到刻度,那它的稀释倍数就是10倍;W是你一开始取的量;F就是待测组分的摩尔质量与称量形式的摩尔质量之比,是个常数,在这里即F=多糖含量/多糖溶液中葡萄糖含量*稀释倍数。
5楼2013-05-16 10:05:09
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ivyasspring at 2013-05-16 10:41:33
计算F时的多糖含量是哪一个?也是一开始取的吗?还是稀释后的溶液中所含有的?多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的吗?...

F中的多糖含量就是一开始取的值,多糖中的葡萄糖含量是通过A值在标准曲线中求得的。如果是一个常数,应该可以查出来的,或者你试试找找。
7楼2013-05-16 10:49:12
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by ivyasspring at 2013-05-16 13:34:40
f应该是多糖的还是葡萄糖的?如果是葡萄糖的话,应该可以查到吧。...

应该是多糖与葡萄糖之比。
9楼2013-05-16 13:43:22
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