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[求助]
分光光度计法测定脂氧合酶活性,求助! 已有1人参与
用下面方法配制的亚油酸底物溶液:
10mg亚麻酸,用无水乙醇溶解定容至 7mL,并加入0. 2 mL吐温-20,接着用旋转蒸发仪将乙醇蒸干。再用15 mL 0. 05 mol/L的Na2HPO4溶液溶解,为了保持底物溶液的澄清而用 1 mol/LNaOH溶液滴定至pH9. 0(但是我没有觉得出现过浑浊)最后用pH值为6.5,0. 2mol/L的磷酸缓冲液将其稀释10倍即为反应底物溶液。所得底物每3ml分装在离心管中,储藏在-20℃条件下备用。
配置好后,在用分光光度计测定时,在调零那步就出现问题。两个石英比色皿加入底物溶液和0.1ml缓冲液后,在234nm下读数很不稳定,在+0.1到-0.3范围内波动,无法调零。不知道为什么,但是在大于300nm条件下同样的底物溶液没有出现这样的情况。求大神解救!~
[ Last edited by 木虫/panda on 2014-5-21 at 22:32 ] |
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