[交流] 部分蛋白不能进入非变性聚丙烯酰胺胶体内

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1楼2013-11-22 10:32:29

cicelyzh

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这很正常。非变性胶条件下，有些蛋白形成多亚基大分子复合体，分子量可以高达mega Dalton级别，不能进入stacking胶也很正常。你先确定要分离的蛋白/蛋白复合体的分子量大致是多少，然后再选择合适的分离PAGE体系。

6楼2013-11-22 11:26:17

查看全部 27 个回答

Davidzjy

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弥散的都很厉害啊。。。

4楼2013-11-22 10:59:30

同东中郎将

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你的蛋白确实分子量太大？？
样品上样前要离心一下，点样点上清。
要不就是跑一下变性胶对比一下。

5楼2013-11-22 11:22:05

cisong

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引用回帖:

6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-22 11:26:17
这很正常。非变性胶条件下，有些蛋白形成多亚基大分子复合体，分子量可以高达mega Dalton级别，不能进入stacking胶也很正常。你先确定要分离的蛋白/蛋白复合体的分子量大致是多少，然后再选择合适的分离PAGE体系。

您好，谢谢您的回复。我想问下，如果是因为分子量太大的缘故，是不是可以考虑跑琼脂糖电泳？琼脂糖的孔径是不是会大很多。

10楼2013-11-22 12:19:37