24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3587  |  回复: 18

YOUNG11

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC 流动相比例差别较大,但出峰的保留时间却不变,是怎么回事?

在做HPLC 时遇到一个非常棘手的问题:改变流动相醇水的比例,当甲醇比例分别为20%,40%,60%,80%时,保留时间基本一致,都在2.85min左右出峰,我想让我的化合物在10分钟左右出峰该怎么做?以前从来没有出现过这种情况,还请高手帮忙解决一下,非常感谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 辛苦了 2013-11-13 01:55:47
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:24:49
如此大比例改变甲醇浓度都没有改变保留时间,有可能你的2.85min是死时间,如果不是的话,检查比例阀或者电磁阀。
2楼2013-11-12 23:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方,岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢积极参与交流 2013-11-13 01:56:14
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:30:50
支持二楼回答。三分钟之内可能是死体积区域。这种情况一般继续减少有机相比例或者降低流速。同时要看看化合物性质,选择合适的色谱体系。比如,物质是酸性的,应该选择酸性流动相,抑制电离,如果碱性过强可以考虑离子对体系。具体情况还得看化合物的性质和你目前的具体条件

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
大家好,才是真的好
3楼2013-11-13 00:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

502859345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:33:54
2.8min有可能跟本就没有被保留,直接流出,所以无乱怎么改流动性比例都是一样,或者说这个体系不太适合。
5楼2013-11-13 09:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hot10086

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by YOUNG11 at 2013-11-13 14:33:31
3min是主要峰,吸收强度达到了4000,但好像是样品里的DMSO,不知道1微摩尔的样品能被检测出来吗?...

你的目标物  254nm下有吸收不?如果有的话 可以开双波长检测器 220nm和254nm, DMSO 在254nm下基本没什么吸收,如果254下有吸收那很可能就是根本没保留,需要降低有机相的比例,如果254下没吸收那就直接100%有机相冲柱子,还是没有的话,那就是吸附了,可以考虑在水相或有机相里加些TFA再冲洗柱子
9楼2013-11-13 17:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:31:30
首先你要确定3min这个峰是你要的主峰,可以从进样量,样品浓度入手,成倍增大或缩小,看峰面积变化.
很有可能你的样品出峰时间太晚吧,或者在这个体系不出峰...需要调整流动相,添加缓冲盐改善出峰时间.
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-11-13 06:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-11-12 23:00:35
如此大比例改变甲醇浓度都没有改变保留时间,有可能你的2.85min是死时间,如果不是的话,检查比例阀或者电磁阀。

我不是学分析的,所以不太明白什么是死时间,因为我进样的化合物含有0.1%的DMSO,所以今早进了一针0.1%的DMSO的缓冲液,发现出峰时间与昨天一系列洗脱剂出来的基本一致,吸收强度也很高,所以我怀疑可能我的东西还没有出来,不知道我的化合物的浓度是1微摩尔,HPLC是否能检测出来?
6楼2013-11-13 14:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-11-13 06:43:13
首先你要确定3min这个峰是你要的主峰,可以从进样量,样品浓度入手,成倍增大或缩小,看峰面积变化.
很有可能你的样品出峰时间太晚吧,或者在这个体系不出峰...需要调整流动相,添加缓冲盐改善出峰时间.

3min是主要峰,吸收强度达到了4000,但好像是样品里的DMSO,不知道1微摩尔的样品能被检测出来吗?
7楼2013-11-13 14:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+1, 辛苦啦 2013-11-15 08:39:29
可以考虑下特殊的色谱柱之类的,有的时候效果很好的说
8楼2013-11-13 14:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyying102

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-14 11:12:43
应该是没有保留,降低甲醇浓度,如果还不保留,只能根据化合物的性质再采取别的方法了,如离子对,混合柱等
10楼2013-11-14 10:40:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 YOUNG11 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 271求调剂 +21 2261744733 2026-04-11 21/1050 2026-04-11 20:19 by Angchemist
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 299求调剂 +7 ZVVZ13 2026-04-08 7/350 2026-04-11 11:54 by zhq0425
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +4 安小满zzz 2026-04-08 4/200 2026-04-11 11:52 by zhq0425
[考研] 22408 352分求调剂 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:42 by maddjdld
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +30 @ASDF1234 2026-04-08 32/1600 2026-04-11 10:30 by Delta2012
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 085404 298分求调剂 +10 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 11/550 2026-04-10 16:44 by wangy0907
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[基金申请] 有爆料,一个青年教师卖房得400万,然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 0703化学求调剂 +21 不知名的小卅 2026-04-08 21/1050 2026-04-09 18:55 by l_paradox
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 085404,334分,求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 304求调剂 +16 c297914 2026-04-05 17/850 2026-04-08 13:00 by grayjzr
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
信息提示
请填处理意见