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李金平

铜虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】主峰保留时间时间不一致

最近在做一个产品的含量,发现用不同批次的流动相保留时间相差很大,
比如:第一天分别配了1010007批、1010008批两个批次的流动相;用1010007批的流动相出峰时间为4.459min、1010008批流动相出峰时间为4.144min。
     第二天配了1010009批得流动相,出峰时间为5.311min。
    1010008批与1010009批流动相得出峰时间相差1.2min。
     注:流动性相配制方法:
     称取约18g的醋酸钠(带3个结晶水)与1000ml的容量瓶中,先加200ml的纯化水,摇晃震荡约2min,然后加15ml的醋酸,再加200ml的纯化水,摇晃震荡约2min后,再用纯化水稀释至刻度,摇晃震荡约2min,最后用醋酸调PH至4.20。
     溶液配制:称25mg的原料至25ml的容量瓶中,加1ml5%的Na2CO3,溶解,然后用流动相稀释至刻度。

有大家知道吗?给带你建议,呵呵,谢谢了
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qiuqinglei5020

金虫 (小有名气)

硫酸大师



pplover(金币+1):感谢指点... 2010-11-01 21:48:57
这三批样品非要做一批配1次流动相吗?你不如一次配好流动相。因为每一次配流动相都有细微的差别导致出峰时间变化。
  不知道你的实验室温度控制如何,室温有时对出峰时间也有影响。
2楼2010-10-30 13:46:03
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李金平

铜虫 (正式写手)

因为我们要做分析方法验证,纯的醋酸盐溶液的流动相也就是用个几天吧,我们验证是要做一两个星期的,所以肯定一次配的流动性是不够的,
3楼2010-10-30 15:02:50
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李金平

铜虫 (正式写手)

我们是有柱温箱控制温度的
4楼2010-10-30 15:05:11
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嘉木

金虫 (正式写手)


pplover(金币+1):感谢提供合理的建议... 2010-11-01 21:49:19
配个标准品做对照,出峰时间跟标准品一致就行了
HPLC的影响因素很多,所以一般看RRT,不看RT
5楼2010-10-30 15:52:28
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51793364

铜虫 (小有名气)


pplover(金币+1):谢谢关注... 2010-11-01 21:49:42
我想问问,你称取25mg是用保留几位小数的天平称的?
再还有每次分析前进针标准样,分析结束后再进针标准可以做做对比。
6楼2010-10-30 20:03:55
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海之冰

新虫 (初入文坛)


pplover(金币+1):谢谢提供合理的建议... 2010-11-01 21:50:14
你确定是流动相的原因吗?你有没有试试看,同一瓶流动相同一个样品做两次。
一般进口的流动相不会差这么多,国产的就...
让生如夏花之绚丽!
7楼2010-10-30 21:13:14
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泉水叮咚3369

金虫 (小有名气)

科学菜鸟


pplover(金币+1):这个提醒提得对... 2010-11-01 21:50:59
你测标样时所用的缓冲盐要与你测样时的缓冲盐保持一致,缓冲盐会对保留时间有影响的
努力不一定有结果,但不努力一定没结果
8楼2010-11-01 08:40:10
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李金平

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 海之冰 at 2010-10-30 21:13:14:
你确定是流动相的原因吗?你有没有试试看,同一瓶流动相同一个样品做两次。
一般进口的流动相不会差这么多,国产的就...

同一批流动相,同一天机子不停,峰的保留时间一致,但用同一瓶流动相、同一样品两天做,出峰时间第一天是4.971min、第二天是5.22min。相差0.25min。
9楼2010-11-01 08:52:35
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lfycdymax

铁杆木虫 (著名写手)

我支持5楼的意见……
突然好想你……
10楼2010-11-01 08:55:36
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