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YOUNG11

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC 流动相比例差别较大,但出峰的保留时间却不变,是怎么回事?

在做HPLC 时遇到一个非常棘手的问题:改变流动相醇水的比例,当甲醇比例分别为20%,40%,60%,80%时,保留时间基本一致,都在2.85min左右出峰,我想让我的化合物在10分钟左右出峰该怎么做?以前从来没有出现过这种情况,还请高手帮忙解决一下,非常感谢。
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hot10086

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by YOUNG11 at 2013-11-13 14:33:31
3min是主要峰,吸收强度达到了4000,但好像是样品里的DMSO,不知道1微摩尔的样品能被检测出来吗?...

你的目标物  254nm下有吸收不?如果有的话 可以开双波长检测器 220nm和254nm, DMSO 在254nm下基本没什么吸收,如果254下有吸收那很可能就是根本没保留,需要降低有机相的比例,如果254下没吸收那就直接100%有机相冲柱子,还是没有的话,那就是吸附了,可以考虑在水相或有机相里加些TFA再冲洗柱子
9楼2013-11-13 17:19:52
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