应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 流动相比例差别较大，但出峰的保留时间却不变，是怎么回事？
191/2返回列表12下一页
查看: 4249  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

YOUNG11

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC 流动相比例差别较大，但出峰的保留时间却不变，是怎么回事？

在做HPLC 时遇到一个非常棘手的问题：改变流动相醇水的比例，当甲醇比例分别为20%，40%，60%，80%时，保留时间基本一致，都在2.85min左右出峰，我想让我的化合物在10分钟左右出峰该怎么做？以前从来没有出现过这种情况，还请高手帮忙解决一下，非常感谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-12 22:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 辛苦了 2013-11-13 01:55:47
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:24:49
如此大比例改变甲醇浓度都没有改变保留时间，有可能你的2.85min是死时间，如果不是的话，检查比例阀或者电磁阀。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-11-12 23:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方，岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢积极参与交流 2013-11-13 01:56:14
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:30:50
支持二楼回答。三分钟之内可能是死体积区域。这种情况一般继续减少有机相比例或者降低流速。同时要看看化合物性质，选择合适的色谱体系。比如，物质是酸性的，应该选择酸性流动相，抑制电离，如果碱性过强可以考虑离子对体系。具体情况还得看化合物的性质和你目前的具体条件

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
大家好，才是真的好
3楼2013-11-13 00:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

502859345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:33:54
2.8min有可能跟本就没有被保留，直接流出，所以无乱怎么改流动性比例都是一样，或者说这个体系不太适合。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-11-13 09:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hot10086

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by YOUNG11 at 2013-11-13 14:33:31
3min是主要峰，吸收强度达到了4000,但好像是样品里的DMSO，不知道1微摩尔的样品能被检测出来吗？...

你的目标物  254nm下有吸收不？如果有的话 可以开双波长检测器 220nm和254nm, DMSO 在254nm下基本没什么吸收，如果254下有吸收那很可能就是根本没保留，需要降低有机相的比例，如果254下没吸收那就直接100%有机相冲柱子，还是没有的话，那就是吸附了，可以考虑在水相或有机相里加些TFA再冲洗柱子
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-11-13 17:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:31:30
首先你要确定3min这个峰是你要的主峰,可以从进样量,样品浓度入手,成倍增大或缩小,看峰面积变化.
很有可能你的样品出峰时间太晚吧,或者在这个体系不出峰...需要调整流动相,添加缓冲盐改善出峰时间.
赞一下 回复此楼
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-11-13 06:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-11-12 23:00:35
如此大比例改变甲醇浓度都没有改变保留时间，有可能你的2.85min是死时间，如果不是的话，检查比例阀或者电磁阀。

我不是学分析的，所以不太明白什么是死时间，因为我进样的化合物含有0.1%的DMSO，所以今早进了一针0.1%的DMSO的缓冲液，发现出峰时间与昨天一系列洗脱剂出来的基本一致，吸收强度也很高，所以我怀疑可能我的东西还没有出来，不知道我的化合物的浓度是1微摩尔，HPLC是否能检测出来？
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-13 14:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-11-13 06:43:13
首先你要确定3min这个峰是你要的主峰,可以从进样量,样品浓度入手,成倍增大或缩小,看峰面积变化.
很有可能你的样品出峰时间太晚吧,或者在这个体系不出峰...需要调整流动相,添加缓冲盐改善出峰时间.

3min是主要峰，吸收强度达到了4000,但好像是样品里的DMSO，不知道1微摩尔的样品能被检测出来吗？
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-13 14:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+1, 辛苦啦 2013-11-15 08:39:29
可以考虑下特殊的色谱柱之类的，有的时候效果很好的说
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-13 14:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyying102

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-14 11:12:43
应该是没有保留，降低甲醇浓度，如果还不保留，只能根据化合物的性质再采取别的方法了，如离子对，混合柱等
赞一下 回复此楼
10楼2013-11-14 10:40:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 YOUNG11 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +36 医学老男孩 2026-08-13 85/4250 2026-08-17 21:23 by lcmdlut
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +5 angus9576 2026-08-17 9/450 2026-08-17 20:57 by ssxclkj
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭