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thy66

铜虫 (正式写手)


[求助] HPLC色谱图中出现两个负峰是怎么回事?

第一个负峰应该是溶剂峰,然后是我的标品,可是又出现一个负峰是怎么回事?
还有,色谱峰面积与其浓度成正比例增加吗?求大神帮忙

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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

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thy66: 金币+1, 有帮助, 我文献查的是这样的啊 2013-04-13 09:08:32
引用回帖:
6楼: Originally posted by thy66 at 2013-04-11 16:39:01
我的样品峰保留时间在3.110,就是图上那个比较高的峰...

那就是你的样品峰把那个倒峰盖掉了,你现在这样做液相肯定是不行的
9楼2013-04-11 16:48:35
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zhqy304

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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thy66: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-13 09:09:40
如果第一个峰确定是溶剂峰,那你的待测峰出峰时间太快了,几乎紧跟着溶剂峰就出来了,最好把流动相比例调一调,使样品峰与溶剂峰之间有一段时间差,否则溶剂峰可能会对待测峰的测定有影响。也许你多进几针,后面的倒峰就没有了,因为你的标品有第二个倒峰,而供试品却没有,有可能是柱子没有平衡好。关于色谱峰面积与浓度的关系问题,应该是浓度增加,峰面积增加。只是如果不是在线性范围内,浓度的增加,而峰面积增加不一定成比例。如果你是照标准做,应该是两者成正比;如果是你自己做标准,那你就要做个线性,看看你现在的浓度是不是与峰面积成正比。
11楼2013-04-12 00:21:07
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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thy66: 金币+2, 有帮助 2013-04-11 13:47:07
原因我也不是很清楚,但是碰到这种问题我会重配流动相,并对柱子进行冲洗。可能跟柱子有关系吧
2楼2013-04-11 13:21:35
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thy66

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 星星的眼睛 at 2013-04-11 13:21:35
原因我也不是很清楚,但是碰到这种问题我会重配流动相,并对柱子进行冲洗。可能跟柱子有关系吧

但是在跑样品的时候就没有第二个负峰了?这是怎么回事呢?
3楼2013-04-11 13:41:03
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by thy66 at 2013-04-11 13:41:03
但是在跑样品的时候就没有第二个负峰了?这是怎么回事呢?...

你的出峰位置在哪,有可能是你的样品峰把那个倒峰盖掉了
4楼2013-04-11 13:56:07
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nrzhw

铁杆木虫 (著名写手)

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你再连续进样几次看一看,第二个倒峰应该是气泡造成的
5楼2013-04-11 16:33:38
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thy66

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 星星的眼睛 at 2013-04-11 13:56:07
你的出峰位置在哪,有可能是你的样品峰把那个倒峰盖掉了...

我的样品峰保留时间在3.110,就是图上那个比较高的峰
6楼2013-04-11 16:39:01
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thy66

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by nrzhw at 2013-04-11 16:33:38
你再连续进样几次看一看,第二个倒峰应该是气泡造成的

如果是气泡的话,不能一加标品就出负峰,而加样品就没有了呀,而且样品保留时间也在负峰之前
7楼2013-04-11 16:40:33
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nrzhw

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by thy66 at 2013-04-11 16:40:33
如果是气泡的话,不能一加标品就出负峰,而加样品就没有了呀,而且样品保留时间也在负峰之前...

你有没有开参比波长?
8楼2013-04-11 16:42:52
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耳朵

木虫 (正式写手)

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thy66: 金币+1, 有帮助 2013-04-13 09:08:48
色谱峰面积与其浓度成正比例增加。
10楼2013-04-11 18:31:03
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