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jakielgh

金虫 (正式写手)

[求助] 上几张高效液相色谱的谱图,各位高人帮助分析一下前面的负峰原因,谢谢 已有1人参与

我是HPLC的小菜,在分析一种甜菜碱型单体(NN-二甲基甲基烯丙基乙酯+氯乙酸的产物)时,水溶液浓度为0.1%,谱图如下:
色谱柱子为ODS 150*4.6 流动相用过100%甲醇,甲醇:水=50:50\80:20,但是都没有出现单体的峰。
后来改用相应的流动相配制谱图依旧,没有明显变化。






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jakielgh

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by panshi3000 at 2012-03-14 16:57:30:
这里的倒峰一般是溶剂峰,一般是全色谱图的最前面一组峰。产生原因:你的溶剂比例和组成和流动相不一致,导致某一时刻吸光度与基线不同。溶剂吸光度低于流动相,就会出现倒峰。另外,1.测定样品应选择适当的吸收波 ...

前面两个峰确实是溶剂峰。但是,我配制的产物溶液是浓度0.1%,且我使用分析纯的1-溴十二烷配制了0.1%,0.5%的溶液分别做了实验,流动相甲醇:水=80:20,还是使用视差检测器,在40min内的谱图
前方无限美好,不要为路边的风景迷惑。
11楼2012-03-14 20:02:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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貌似溶剂峰,波长是不是在210左右,如果是这个波长的话,肯定是溶剂峰了
5楼2012-03-13 13:03:57
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jakielgh

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by herenren at 2012-03-13 08:55:01:
你是什么检测器?
如果是RID检测器的话就是正常现象

使用的RID检测器。照色谱的原理任何物质都会存在折光率差异,在一定时间内都会出峰。
前方无限美好,不要为路边的风景迷惑。
7楼2012-03-13 14:22:34
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普通回帖

herenren

禁虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2012-03-13 08:55:01
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slmu3404

金虫 (正式写手)

我们用的UV检测器,也会出现这种情况,一直当是流动相中水引起的。都是直接去掉~~~难道一直错的??
加油
3楼2012-03-13 09:32:28
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个应该是溶剂峰吧……你要是换流动相溶解是不是就没有了或者小很多了?样品找不到峰的话,你确定你用的是最大吸收波长?另外,跑的时间长点试试,也许是出峰时间过长,还有就是把有机相比例调大一些。还有个原因,就是pH问题了,也许是你分析的物质需要在一定PH下才能出峰呢?
4楼2012-03-13 10:32:40
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
溶剂峰,流动相有紫外吸收的杂质引起。也可能检测器的性能问题引起的倒峰
守候在风中的宁静。
6楼2012-03-13 13:14:55
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herenren

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2012-03-13 15:57:35
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robincxm

金虫 (初入文坛)

用紫外可能是参比波长不对,你看看能不能改一下参比波长
9楼2012-03-14 13:10:37
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panshi3000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这里的倒峰一般是溶剂峰,一般是全色谱图的最前面一组峰。产生原因:你的溶剂比例和组成和流动相不一致,导致某一时刻吸光度与基线不同。溶剂吸光度低于流动相,就会出现倒峰。另外,1.测定样品应选择适当的吸收波长,一般在最大吸收峰的波长处,做一个扫描就行。2.ODS柱最好不要用100%的有机溶剂,损坏柱子。3.从第一张图的峰高看,样品和溶剂峰仪器出来了。说明你的有机相比例太大了,进一针空白溶剂对比一下就知道了。4.样品的浓度低,用流动相溶解,初始实验浓度一般在1mg/mL上下。这个根据项目灵活调整
10楼2012-03-14 16:57:30
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