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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 上几张高效液相色谱的谱图，各位高人帮助分析一下前面的负峰原因，谢谢
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jakielgh

金虫 (正式写手)

[求助] 上几张高效液相色谱的谱图，各位高人帮助分析一下前面的负峰原因，谢谢 已有1人参与

我是HPLC的小菜，在分析一种甜菜碱型单体（NN-二甲基甲基烯丙基乙酯+氯乙酸的产物）时，水溶液浓度为0.1%，谱图如下：
色谱柱子为ODS 150*4.6 流动相用过100%甲醇，甲醇：水=50：50\80：20，但是都没有出现单体的峰。
后来改用相应的流动相配制谱图依旧，没有明显变化。
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前方无限美好，不要为路边的风景迷惑。
1楼 2012-03-13 08:53:04
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panshi3000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这里的倒峰一般是溶剂峰，一般是全色谱图的最前面一组峰。产生原因：你的溶剂比例和组成和流动相不一致，导致某一时刻吸光度与基线不同。溶剂吸光度低于流动相，就会出现倒峰。另外，1.测定样品应选择适当的吸收波长，一般在最大吸收峰的波长处，做一个扫描就行。2.ODS柱最好不要用100%的有机溶剂，损坏柱子。3.从第一张图的峰高看，样品和溶剂峰仪器出来了。说明你的有机相比例太大了，进一针空白溶剂对比一下就知道了。4.样品的浓度低，用流动相溶解，初始实验浓度一般在1mg/mL上下。这个根据项目灵活调整
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10楼2012-03-14 16:57:30
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herenren

禁虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2012-03-13 08:55:01
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slmu3404

金虫 (正式写手)
我们用的UV检测器，也会出现这种情况，一直当是流动相中水引起的。都是直接去掉~~~难道一直错的？？
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加油
3楼2012-03-13 09:32:28
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个应该是溶剂峰吧……你要是换流动相溶解是不是就没有了或者小很多了？样品找不到峰的话，你确定你用的是最大吸收波长？另外，跑的时间长点试试，也许是出峰时间过长，还有就是把有机相比例调大一些。还有个原因，就是pH问题了，也许是你分析的物质需要在一定PH下才能出峰呢？
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4楼2012-03-13 10:32:40
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