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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 急~高效液相色谱出峰位置不对【如图】
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saltrong

木虫 (正式写手)

[求助] 急~高效液相色谱出峰位置不对【如图】

请教各位大虾，为什么高效液相我上完样以后，出来的峰是在基线以下呢？波长220nm，样品是提取的多肽，样品浓度1mg/mL，进样量20μL，流动相是0-50%乙腈梯度洗脱。
在线急等回答~谢谢~


[ Last edited by saltrong on 2011-12-13 at 20:00 ]
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1楼 2011-12-13 19:33:07
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abczhan

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西湖醉鱼(金币+1): 鼓励新人奖 2011-12-13 20:42:19
是不是样品受污染了呀
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用知识武装自己的头脑
2楼2011-12-13 20:17:14
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saltrong

木虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by abczhan at 2011-12-13 20:17:14:
是不是样品受污染了呀

应该没有吧 都是新鲜配制的 而且容器是干净的啊~
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3楼2011-12-13 20:27:24
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lvyalin418

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是水的问题？还有试剂是不是国产的？
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4楼2011-12-13 20:58:02
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你平衡时间是多少，特别是梯度，先提前把系统平衡一段时间再进样吧
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5楼2011-12-13 22:32:19
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是所用试剂（或样品溶剂）背景吸收太高了（纯度不够，即使色谱纯，不同厂家依旧有差别）。而且在220nm。。。
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守候在风中的宁静。
6楼2011-12-13 22:55:21
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先冲洗一下系统，排除空气。再平衡
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奋斗是金！
7楼2011-12-14 08:17:15
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majiangshan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这峰出的像是杂峰，楼主是不是柱子没洗干净或是气泡没完全排走
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让梦想照进现实
8楼2011-12-14 09:59:48
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朝阳小狐狸

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的0~50%乙腈梯度洗脱，其中水相有调PH吗？多肽，我没有做过，不太确定你用的水相的PH，eg：如果你用的是醋酸水,在220nm波长，基线下漂是非常正常的现象，故低波段不用醋酸水调PH；若直接是用的水，可以把梯度设的缓和一些，或者先等度一会再进行梯度，也会改善梯度。
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9楼2011-12-14 14:00:51
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ntzsl

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的平衡时间不够造成的。
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大家互相学习
10楼2011-12-14 16:47:47
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