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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请问HPLC不使用色谱柱能出峰吗？
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futurememory

金虫 (小有名气)

[求助] 请问HPLC不使用色谱柱能出峰吗？

这个问题比较诡异。实验室新买了HPLC，软件什么的不是很稳定，怕把柱子用坏了。没装柱子跑了甲苯（265检测）和罗丹明B（550检测），流动相是甲醇和水，采集的数据各种各样，有时候有峰，有时候是斜向上的直线，有时候就是基线。这是因为没有装柱子的问题吗？
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努力地生活着
1楼 2012-10-31 08:28:14
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proxyz

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
futurememory: 金币+1, ★有帮助, 谢谢！ 2012-10-31 11:28:17
没柱子也可以出峰的
你连接对了没？或者检测器没开？
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2楼2012-10-31 08:32:45
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+2, 感谢您的解答，欢迎常来分析版 2012-10-31 08:57:20
futurememory: 金币+1, ★有帮助 2012-10-31 11:28:39
不安装色谱柱也出峰。

是不是新仪器管路没冲好的原因。把流动相中甲醇比例增大，多稳定一段时间再试试
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
3楼2012-10-31 08:33:19
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futurememory

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 08:33:19
不安装色谱柱也出峰。

是不是新仪器管路没冲好的原因。把流动相中甲醇比例增大，多稳定一段时间再试试

大约要稳定多久呢？ 之前工程师来过，用他的柱子和样品跑的结果挺好的。后来实验室没人用就闲置了一段时间。没装柱子会很快出峰吗？我在建立methods的时候它默认有一段时间的pre-run，最少0.5 min，数据是从0.5min之后开始采集的，我用1ml/min的流速，不会错过出峰了吧？
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努力地生活着
4楼2012-10-31 08:42:59
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
futurememory: 金币+1, ★有帮助 2012-10-31 11:28:46
引用回帖:
4楼: Originally posted by futurememory at 2012-10-31 08:42:59
大约要稳定多久呢？ 之前工程师来过，用他的柱子和样品跑的结果挺好的。后来实验室没人用就闲置了一段时间。没装柱子会很快出峰吗？我在建立methods的时候它默认有一段时间的pre-run，最少0.5 min，数据是从0.5min ...

首先确认管路是干净的，可以用80%甲醇冲一两个小时

多长时间出峰跟你仪器的死体积有关系，有的是半分钟，有的能一分钟多，不好说的，所以建议你去掉pre-run，从进样就开始采集
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
5楼2012-10-31 08:54:41
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futurememory

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 08:54:41
首先确认管路是干净的，可以用80%甲醇冲一两个小时

多长时间出峰跟你仪器的死体积有关系，有的是半分钟，有的能一分钟多，不好说的，所以建议你去掉pre-run，从进样就开始采集...

设置pump参数的时候，step0 必须至少0.5，我再研究研究说明书看。是Perkin elmer的Flexar HPLC，不知道有没有人用过？总觉得以前没听说过。
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努力地生活着
6楼2012-10-31 09:03:49
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
futurememory: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-31 11:29:00
引用回帖:
6楼: Originally posted by futurememory at 2012-10-31 09:03:49
设置pump参数的时候，step0 必须至少0.5，我再研究研究说明书看。是Perkin elmer的Flexar HPLC，不知道有没有人用过？总觉得以前没听说过。...

每个液相都应该可以从进样就可以采集的

楼主说的0.5是不是泵的梯度时间？
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
7楼2012-10-31 09:14:00
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cily1986

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
futurememory: 金币+1, ★有帮助 2012-10-31 11:29:09
可以出峰，只要经过检测器检测到就会出峰，柱子只是起到分离的作用，建议用甲醇多冲下系统试试，时间长一点
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8楼2012-10-31 10:37:01
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小西523

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也碰到这种不出峰的事情了，不接柱子，什么都没有，就是一根斜向上的线，你解决可了吗？
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9楼2012-10-31 14:27:08
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futurememory

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by akosrios at 2012-10-31 09:14:00
每个液相都应该可以从进样就可以采集的

楼主说的0.5是不是泵的梯度时间？...

就是类似下图的界面。我不用跑梯度，就设了step1，没有设step2，系统就默认step0那里time必须0.5，而detector的时间是从step1开始的。

1.jpg
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努力地生活着
10楼2012-10-31 14:53:28
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