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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 流动相比例差别较大，但出峰的保留时间却不变，是怎么回事？
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-14 11:16:14
本帖内容被屏蔽
11楼2013-11-14 11:09:52
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YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-14 11:09:52
DMSO用C18柱基本是没有保留的 我做多肽的时候会用到 10%的甲醇基本就洗脱了 lz应该做的是降低有机相比例 比如起始用100%的水

我做的不是多肽，就是普通的小分子，溶在含有0.1%的DMSO的PBS缓冲液中，C18柱可以用100%的水冲吗？压力会不会太大？没有保留是什么意思？是直接被冲出来，没有出峰吗？
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12楼2013-11-14 11:21:43
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★ ★
YOUNG11: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-11-14 18:24:08
本帖内容被屏蔽
13楼2013-11-14 13:01:22
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心舞飞扬0708

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是死体积、、、、
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14楼2013-11-14 17:22:06
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
你的化合物极性过大，不适合用这个分离，可以降低甲醇比例至5%。也可以用HILIC分离，加酸碱都可以尝试下啊
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15楼2013-11-14 19:41:57
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bbeerrss

禁虫 (知名作家)
★
YOUNG11: 金币+1, ★有帮助 2013-11-16 08:59:41
本帖内容被屏蔽
16楼2013-11-15 23:12:09
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YOUNG11

新虫 (小有名气)
谢谢各位的解答，我的问题已经解决了，问题出在我的化合物配的浓度太低，根本就没有检测到，我一直把3min出来的峰当成了我的东西，其实那是DMSO的峰。很低级的错误，写出来希望对其他人有所帮助，尤其是像我一样的菜鸟。
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17楼2013-11-16 09:03:24
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深海之蓝zhb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
YOUNG11: 金币+1, ★有帮助 2013-12-08 16:16:54
改变甲醇这么多都在2.多分钟，真的可能是溶剂峰，主峰很有可能还没出来，你需要耐心等待。
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18楼2013-12-05 16:47:18
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yuan401

新虫 (初入文坛)
同问！我用hplc反相柱分析，60%，55%，50%，40%分析，出峰时间有推迟，但是改变的很小，都平均延长0。7分钟，但是，我想要拖到7分钟，想要制备，但是，以前的师兄师姐没有做过极性这么大的，大概会是什么类型，以及我该用多少的甲醇水？我是做珊瑚分离提取的研一，求支援
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19楼2014-05-19 15:42:47
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