24小时热门版块排行榜    

查看: 3479  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC 流动相比例差别较大,但出峰的保留时间却不变,是怎么回事?

在做HPLC 时遇到一个非常棘手的问题:改变流动相醇水的比例,当甲醇比例分别为20%,40%,60%,80%时,保留时间基本一致,都在2.85min左右出峰,我想让我的化合物在10分钟左右出峰该怎么做?以前从来没有出现过这种情况,还请高手帮忙解决一下,非常感谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

YOUNG11

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by swallow13 at 2013-11-14 11:09:52
DMSO用C18柱基本是没有保留的 我做多肽的时候会用到 10%的甲醇基本就洗脱了 lz应该做的是降低有机相比例 比如起始用100%的水

我做的不是多肽,就是普通的小分子,溶在含有0.1%的DMSO的PBS缓冲液中,C18柱可以用100%的水冲吗?压力会不会太大?没有保留是什么意思?是直接被冲出来,没有出峰吗?
12楼2013-11-14 11:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 辛苦了 2013-11-13 01:55:47
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:24:49
如此大比例改变甲醇浓度都没有改变保留时间,有可能你的2.85min是死时间,如果不是的话,检查比例阀或者电磁阀。
2楼2013-11-12 23:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方,岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢积极参与交流 2013-11-13 01:56:14
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:30:50
支持二楼回答。三分钟之内可能是死体积区域。这种情况一般继续减少有机相比例或者降低流速。同时要看看化合物性质,选择合适的色谱体系。比如,物质是酸性的,应该选择酸性流动相,抑制电离,如果碱性过强可以考虑离子对体系。具体情况还得看化合物的性质和你目前的具体条件

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
大家好,才是真的好
3楼2013-11-13 00:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-11-13 14:31:30
首先你要确定3min这个峰是你要的主峰,可以从进样量,样品浓度入手,成倍增大或缩小,看峰面积变化.
很有可能你的样品出峰时间太晚吧,或者在这个体系不出峰...需要调整流动相,添加缓冲盐改善出峰时间.
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-11-13 06:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
信息提示
请填处理意见