24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2567  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

runying36

银虫 (正式写手)

[求助] 外源蛋白在毕赤酵母中不表达

有哪位热心的战友给提示一下,我的外源蛋白在毕赤酵母中不表达,实验室同期做得都有表达,说明系统没有问题,但我的为什么没表达?有么有实战经验,一般这种情况先从哪方面试比较靠谱?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
runying36: 金币+1, 有帮助, 做了WB没检测到信号,这样不知道优化这些方面会不会有实质性改变 2013-11-05 01:03:05
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-05 12:42:03
酵母表达影响因素很多:比较重要的考虑甲醇的量,诱导温度,诱导时间,接种量和酸碱度等,还有就是你的蛋白可能表达了,只是检测方法不当也不无可能,有标签的蛋白建议做WB;还有酵母表达有糖基化修饰,会导致实际蛋白大小比理论值要大一些。
爱拼才会赢
3楼2013-11-04 21:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
runying36: 金币+1, 有帮助, 做了WB没检测到信号 2013-11-05 01:02:21
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-05 12:41:56
不表达还是表达量低,有没有做WB检测下;
如果是不表达:考虑目的基因有没有启动子;再就是考虑重组转化的问题了。
如果表达量低:可能是基因序列不适合毕赤酵母表达体系,可以考虑优化密码子;  或者体内体外构建多拷贝增加表达量,发酵条件的筛选也可以尝试
2楼2013-11-04 21:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaopeiliang at 2013-11-04 21:48:47
不表达还是表达量低,有没有做WB检测下;
如果是不表达:考虑目的基因有没有启动子;再就是考虑重组转化的问题了。
如果表达量低:可能是基因序列不适合毕赤酵母表达体系,可以考虑优化密码子;  或者体内体外构建 ...

拷贝数的增加并不一定能增加蛋白表达量,只是理论上有可能而已。
爱拼才会赢
4楼2013-11-04 21:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by anyaxiong at 2013-11-04 21:52:36
拷贝数的增加并不一定能增加蛋白表达量,只是理论上有可能而已。...

不止理论,实际上也很多,呵呵
5楼2013-11-04 22:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 280求调剂 +13 咕噜晓晓 2026-04-02 14/700 2026-04-02 22:53 by 无际的草原
[考研] 309分085801求调剂 +10 学员Gtwj7W 2026-03-31 10/500 2026-04-02 22:42 by yunlongyang
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-02 7/350 2026-04-02 21:49 by dongzh2009
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-02 11/550 2026-04-02 20:16 by yulian1987
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考博] 材料工程专业硕士申博 +3 麟正宇 2026-03-30 3/150 2026-04-02 15:04 by greychen00
[考研] 理学07化学 303求调剂 +16 睿08 2026-03-27 17/850 2026-04-02 13:29 by 七度不信任
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +19 1428151015 2026-03-27 19/950 2026-04-01 22:34 by peike
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +12 hanamiko 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:34 by 运气yunqi
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 085601材料工程找调剂 +20 oatmealR 2026-03-29 21/1050 2026-04-01 21:00 by lijunpoly
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +10 脚滑的守法公民 2026-03-27 10/500 2026-04-01 17:23 by pies112
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
信息提示
请填处理意见