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Murzhy

新虫 (初入文坛)

[求助] Native-PAGE 样品条带拖尾

大家好,有一个问题想请教大家。
我最近在做Native-PAGE,样品跑出来后,有条带拖尾现象,具体来说,是左右两边各有一个小尾巴。我在网上搜索了一下,发现大多这方面的问题都是说条带弥散,或者直接拖很大的尾巴,像我这种左右两侧拖的还没见过。不知道哪位大牛可以解决一下,谢谢!!
Native-PAGE 样品条带拖尾
131025 Second NP.jpg
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Murzhy: 金币+1, 有帮助 2013-11-01 19:35:43
1.浓缩胶跑时间长一点
2.电压低一点,120V试一下
3.你的分子量很大,条带靠上,分离胶可以浓度在低一点
4.如果可以低温,尝试一下
5.还有就是Load Buffer与样品的比例,可以调试一下看看有没有好效果
6.,Good luck
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-10-30 09:17:52
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Murzhy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-10-30 09:17:52
1.浓缩胶跑时间长一点
2.电压低一点,120V试一下
3.你的分子量很大,条带靠上,分离胶可以浓度在低一点
4.如果可以低温,尝试一下
5.还有就是Load Buffer与样品的比例,可以调试一下看看有没有好效果
6. ...

谢谢您的回复。
1.我这个是Native-PAGE,电泳条件:冰浴电泳,浓缩胶100v,分离胶150-200v,或者全程10mA。通常我的溴酚蓝已经跑出来了,但是样品染色后还是很靠上。蛋白分子量并不大,第一泳道是11kD,但是可以看出还是很难跑下来。
2.电压再调低的话,电流通常只有3-4mA了。
3.分离胶浓度我下回会试一下。
3楼2013-10-30 11:10:33
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2015yu

新虫 (初入文坛)

4楼2017-03-06 08:59:49
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郭小勺

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Murzhy at 2013-10-30 11:10:33
谢谢您的回复。
1.我这个是Native-PAGE,电泳条件:冰浴电泳,浓缩胶100v,分离胶150-200v,或者全程10mA。通常我的溴酚蓝已经跑出来了,但是样品染色后还是很靠上。蛋白分子量并不大,第一泳道是11kD,但是可以看 ...

你用的多少的下层胶

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-03-09 21:28:40
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