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丫头7976

铜虫 (正式写手)

[交流] BN-PAGE 低分量的marker 已有2人参与

谁用过低分子量的跑BN-PAGE的marker，我只找到了GE公司的HMW,范围是66KD-669KD,对我的蛋白来说太大了，有没有人用过低分子量的（for native-page），不是GE公司的也成，多谢啦
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丫头7976

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1楼 2012-10-10 11:59:41
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 热心的虫虫啊 2012-10-10 19:19:32
Invitrogen有个native protein marker，最小的带是20kDa，不过我没有用过。Sigma有个14-545kDa的非变性蛋白marker，我定过一个，上BN胶后什么都看不到，再染色也基本看不到条带。我上次推荐的GE HMW marker是好用的。话说回来，BN胶对于分子量在100-700kD范围内的蛋白复合体的分辨率比较好，分子量量小于66kDa的蛋白复合体在BN胶上的分辨率不是很高，你为什么要纠结在BN-PAGE上呢？其它非变性胶体系也可以试试。
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丫头7976
2楼2012-10-10 12:17:01
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丫头7976

铜虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-10 12:17:01
Invitrogen有个native protein marker，最小的带是20kDa，不过我没有用过。Sigma有个14-545kDa的非变性蛋白marker，我定过一个，上BN胶后什么都看不到，再染色也基本看不到条带。我上次推荐的GE HMW marker是好用的 ...

先谢谢你的关注啊，我有个几个膜蛋白分子量分别在35KD，45KD左右，想看看是不是形成了多聚体，看文献上用的方法是BN-PAGE,
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3楼2012-10-10 19:26:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-11 15:58:09
引用回帖:
3楼: Originally posted by 丫头7976 at 2012-10-10 19:26:57
先谢谢你的关注啊，我有个几个膜蛋白分子量分别在35KD，45KD左右，想看看是不是形成了多聚体，看文献上用的方法是BN-PAGE,...

你可以试试直接跑文献描述的BN-PAGE不用marker，不要把前沿跑出去，如果不形成多聚体，或者和其它膜蛋白作用的话，会跑得很快，就在蓝色前沿后面一点。很多膜蛋白会与其它蛋白作用形成复合体或者多聚体，BN胶上的分子量会很大，即使没有文献报导过。根据你的预实验结果再决定买什么marker。
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4楼2012-10-11 06:03:19
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丫头7976

铜虫 (正式写手)
送鲜花一朵
嗯，多谢你啦，好好努力，有结果了或者有什么问题再向你请教啊
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5楼2012-10-11 09:11:41
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喏！韵律＆

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 丫头7976 at 2012-10-10 19:26:57
先谢谢你的关注啊，我有个几个膜蛋白分子量分别在35KD，45KD左右，想看看是不是形成了多聚体，看文献上用的方法是BN-PAGE,...

你好，我在做BN-PAGE 想问一下你，可以加你QQ吗
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6楼2014-10-27 08:52:25
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