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tangxi99

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳marker方面的请教

实验室换了多家marker公司,其中包括国产和进口marker,都跑电泳跑不出来,但是同一板胶样品又能够跑出来,好奇怪~有哪位大侠能够解答下么?
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小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)

爱可口不爱百事

【答案】应助回帖

tangxi99(金币+1): 操作步骤什么的我们实验室都有,我只是想知道这种现象的原因,谢谢! 2011-07-23 23:19:49
引用回帖:
Originally posted by tangxi99 at 2011-07-22 19:33:41:
实验室换了多家marker公司,其中包括国产和进口marker,都跑电泳跑不出来,但是同一板胶样品又能够跑出来,好奇怪~有哪位大侠能够解答下么?

看看前人的经验,应该可以帮助你……
2楼2011-07-22 21:13:45
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zhao_xuewei

新虫 (正式写手)

上样少了??
3楼2011-07-24 17:19:50
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bingpan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

分子量范围对吗?样品的分子量大概范围楼主知道吗,如果单跑Maker,能出来条带吗?
4楼2011-07-25 09:18:23
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tangxi99

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小损样儿 at 2011-07-22 21:13:45:
看看前人的经验,应该可以帮助你……

按照说明上了啊~7ul,后面又跑了个15ul的也没有跑出来
永远不要放弃自己
5楼2011-08-01 13:37:18
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hejiang168

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
树树8013(金币+2): 欢迎常来板块发帖、回帖。 2011-08-01 22:31:07
tangxi99(金币+1): 3Q!我试一下、、、 2011-08-02 08:56:48
如果样品的浓度过高,那么在染色时,样品的条带会很快出现,而此时Marker的条带可能还没有出来!
建议:紫外法先大概测定样品的浓度,对比Maker说明上的蛋白浓度,调节二者至同一数量级。
6楼2011-08-01 20:34:35
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铁哥

新虫 (初入文坛)

买回来的maker在用超纯水稀释前,应先把管子在离心机上,离心到prm300左右,作用是使maker沉到离心管底部。应为maker的分子量比较小,很容易黏在离心管壁和盖子上面。
7楼2011-08-04 19:19:11
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简约豆豆

金虫 (小有名气)

不太明白楼主的意思,是说,光单独跑marker也没有跑出条带吗?如果这样,
1. 看你选择的marker的分子量和胶的浓度想符合吗?
2. 一般说,SDS-PAGE电泳, 还是很容易跑的呀.你上样7微升绝对很大量了,不知道浓度够吗?
先把marker跑好,再去跑样品。一步一步来。
8楼2011-08-11 11:03:25
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