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Native-PAGE 样品条带拖尾
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Murzhy
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Native-PAGE 样品条带拖尾
大家好,有一个问题想请教大家。
我最近在做Native-PAGE,样品跑出来后,有条带拖尾现象,具体来说,是左右两边各有一个小尾巴。我在网上搜索了一下,发现大多这方面的问题都是说条带弥散,或者直接拖很大的尾巴,像我这种左右两侧拖的还没见过。不知道哪位大牛可以解决一下,谢谢!!
131025 Second NP.jpg
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1楼
2013-10-29 20:02:43
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同东中郎将
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【答案】应助回帖
★
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Murzhy: 金币+1,
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有帮助
2013-11-01 19:35:43
1.浓缩胶跑时间长一点
2.电压低一点,120V试一下
3.你的分子量很大,条带靠上,分离胶可以浓度在低一点
4.如果可以低温,尝试一下
5.还有就是Load Buffer与样品的比例,可以调试一下看看有没有好效果
6.
,Good luck
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曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼
2013-10-30 09:17:52
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Murzhy
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专业: 微生物生理与生物化学
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
同东中郎将
at 2013-10-30 09:17:52
1.浓缩胶跑时间长一点
2.电压低一点,120V试一下
3.你的分子量很大,条带靠上,分离胶可以浓度在低一点
4.如果可以低温,尝试一下
5.还有就是Load Buffer与样品的比例,可以调试一下看看有没有好效果
6.
...
谢谢您的回复。
1.我这个是Native-PAGE,电泳条件:冰浴电泳,浓缩胶100v,分离胶150-200v,或者全程10mA。通常我的溴酚蓝已经跑出来了,但是样品染色后还是很靠上。蛋白分子量并不大,第一泳道是11kD,但是可以看出还是很难跑下来。
2.电压再调低的话,电流通常只有3-4mA了。
3.分离胶浓度我下回会试一下。
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3楼
2013-10-30 11:10:33
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2015yu
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专业: 微生物生理与生物化学
我也是这样,跑步下去
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4楼
2017-03-06 08:59:49
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郭小勺
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专业: 生物化学
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3楼
:
Originally posted by
Murzhy
at 2013-10-30 11:10:33
谢谢您的回复。
1.我这个是Native-PAGE,电泳条件:冰浴电泳,浓缩胶100v,分离胶150-200v,或者全程10mA。通常我的溴酚蓝已经跑出来了,但是样品染色后还是很靠上。蛋白分子量并不大,第一泳道是11kD,但是可以看 ...
你用的多少的下层胶
发自小木虫IOS客户端
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5楼
2017-03-09 21:28:40
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