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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

[求助] SDS-PAGE泳道形状诡异

跑SDS-PAGE把细胞裂解液上样结果跑出来这么奇怪的形状(最右边两个泳道)
我可以保证不是胶制备的问题, 换了好几块胶了
上样的时候其他的泳道都没问题,就是只要把这个细胞裂解液加上去,对应的泳道就肯定就跑成这鬼样子
电解缓冲液也没问题, 实验室其他人拿我配的缓冲液跑都没事
大概就是这裂解液样品的问题....请问这是不是盐浓度太高了?还是盐浓度太低了?我这里面还有少量NP-40,不应该影响吧?大概还会残留一些养细胞用的MEM...
见了鬼了,按理说我这缓冲液最多只是PBS
SDS-PAGE泳道形状诡异
yf_6_131_linker_pulldown_cbb.jpg
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
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makubex83

至尊木虫 (知名作家)

上样量太大,逐步两倍的稀释一下,跑一下就知道了
7楼2013-10-06 23:05:39
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查看全部 9 个回答

同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-05 17:01:36
fuyuandj86: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-10-06 01:08:52
这位同学,你的上样量太大了的结果,可以把你的样品先稀释一下再上样。先稀释5倍看看吧,不行的话少上一点,上样量蛋白太多了。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-10-05 08:57:35
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feipiaolw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2013-10-05 17:01:43
fuyuandj86: 金币+2, 有帮助 2013-10-06 01:09:07
上样量太大,或者把裂解液过滤纯化下再电泳。
学术一点,挺好的,要坚持
3楼2013-10-05 09:24:45
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yonghuixie

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-10-05 17:01:50
fuyuandj86: 金币+2, 有帮助 2013-10-06 01:09:28
本帖内容被屏蔽

4楼2013-10-05 14:28:51
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