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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA电泳图，麻烦大家帮忙分析下
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sujunfeng89

金虫 (小有名气)

[交流] RNA电泳图，麻烦大家帮忙分析下 已有6人参与

大肠杆菌的RNA,提了很多次了，总是感觉不好，做相对定量用的，大家帮忙分析下需不需要重提。（marker 用的是1000的） 感激万分！
RNA电泳图，麻烦大家帮忙分析下
RNA.jpg
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1楼 2013-10-03 15:49:13
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qapollo

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-03 16:08:27
你用什么方法提的？最下面的5S有点太亮了，RNA有一定的降解，如果做定量效果不会太好，有条件的话建议重提。
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2楼2013-10-03 16:07:22
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sujunfeng89

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qapollo at 2013-10-03 16:07:22
你用什么方法提的？最下面的5S有点太亮了，RNA有一定的降解，如果做定量效果不会太好，有条件的话建议重提。

用Takara的RNAiso plus 提的，用溶菌酶处理的菌体，也用液氮研磨提过，条带也一样，最下面的5S也是很亮，有必要在冰上操作吗？
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3楼2013-10-03 16:58:28
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流氓有文化

新虫 (小有名气)
★
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我想问一下，你的maker呢？
maker看不清
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4楼2013-10-03 17:39:53
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sujunfeng89

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 流氓有文化 at 2013-10-03 17:39:53
我想问一下，你的maker呢？
maker看不清

没跑开，前面的是marker
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5楼2013-10-03 18:25:17
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qapollo

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
3楼: Originally posted by sujunfeng89 at 2013-10-03 16:58:28
用Takara的RNAiso plus 提的，用溶菌酶处理的菌体，也用液氮研磨提过，条带也一样，最下面的5S也是很亮，有必要在冰上操作吗？...

室温应该就行，估计是你的手法还不熟练，再提一次试试。试剂盒很好用应该没问题。另外，鉴定RNA完整性不点Maker也行
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6楼2013-10-03 18:38:30
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这是普通胶电泳吧。
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7楼2013-10-04 11:53:52
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John_Chen

银虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-05 17:02:13
你的RNA有部分降解，做定量用不是很好，因为大肠杆菌生长很快，建议重提。提RNA肯定要冰上操作，离心时用4度离心。
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勤能补拙
8楼2013-10-04 12:30:01
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sujunfeng89

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zgb1982 at 2013-10-04 11:53:52
这是普通胶电泳吧。

TAE、 1%琼脂糖凝胶
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9楼2013-10-05 08:57:49
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sujunfeng89

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qapollo at 2013-10-03 18:38:30
室温应该就行，估计是你的手法还不熟练，再提一次试试。试剂盒很好用应该没问题。另外，鉴定RNA完整性不点Maker也行...

谢谢，我试试看
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10楼2013-10-05 09:03:07
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