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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白质纯化总是挂不上柱子，全洗脱下来了，请大家帮忙一下哦
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1楼 2013-09-29 20:12:16
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ssyyll1019

铜虫 (小有名气)
应该是His 标签没有暴露出来，蛋白变性不彻底。
换用盐酸胍 应该可以解决 问题的。
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5楼2013-09-30 17:14:27
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sageyaya

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-30 08:35:51
zq191236086: 金币+5 2013-10-01 16:37:34
蛋白质包涵体的话一般都是做包涵体变复性，因为你的蛋白都是包涵体，也就是在沉淀里，上清里面没有蛋白，挂柱子也就没有必要了。
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2楼2013-09-29 21:39:26
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-30 08:36:02
zq191236086: 金币+5 2013-10-01 16:38:50
你用6M盐酸胍变性  洗杂蛋白和洗脱时换成尿素，基本没问题
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3楼2013-09-30 08:14:57
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iayala

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-30 08:36:09
另外，是通过标签挂柱子吧，不放心的话，买标签的ELISA检测试剂盒看看标签在不在，或者干脆买单抗，或者干脆买目的蛋白的抗体，这样可以完成目的蛋白的定性，看清问题究竟出在哪里。
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4楼2013-09-30 08:26:43
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