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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真核生物mRNA的RT-PCR
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zhougama

禁虫 (正式写手)
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1楼 2013-09-26 16:34:28
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北极胖熊

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-27 20:26:51
zhougama: 金币+5, ★有帮助 2013-10-07 17:03:13
mRNA是DNA外显子的转录产物，不要考虑那么多，mRNA逆转录cDNA是有功能的一段，修饰有几种方式，逆转录过来的应该没有差异，因为你的引物就决定了产物
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5楼2013-09-27 16:47:59
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15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-27 20:26:26
zhougama: 金币+2, ★有帮助 2013-10-07 17:02:50
正确。   如果基因有内含子的话RT-PCR就会有多条带
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2楼2013-09-26 18:14:55
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great07225388

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-27 20:26:33
zhougama: 金币+5, ★有帮助 2013-10-07 17:03:02
no.理论上分析是会出现很多条带，但是实际上做RT-PCR的时候并没有出现很多条带。RNA分三类，mRNA，tRNA和rRNA，能做RT-PCR的只有mRNA，因为只有mRNA有poly-A尾。细胞内mRNA绝大部分都以成熟的mRNA出现，没有成熟或者部分成熟的mRNA仅仅是很少一部分，在做RT-PCR时可以忽略作为模板的功能。因此没有出现多条带的情况。
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3楼2013-09-27 11:33:30
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iayala

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-27 20:26:43
成熟的mRNA才会有polyA尾，有polyA尾才会被反转录。
另外，你说的修饰到底是哪种修饰？？英文描述是什么，拼接，编辑会造成mRNA的结构的改变。加帽，加尾修饰不会极大地改变mRNA的序列啊，怎么可能有可区分的杂带呢。
如果你说的修饰指的是拼接，编辑，那么一般的，能产生杂带的各种form的mRNA，一般都没有polyA尾，因此它们无法在PCR时得到扩增，也就形不成杂带。
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4楼2013-09-27 16:14:21
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